التكنولوجيا الحيوية

والجينوم .وفى الواقع تأثير البيئة تم فهمه كتلميح خارجى والنافذة الحرجة لحساسية العوامل الخارجية غير الوراثية " "epigemetic vulnerabilityهى فترة التكوين الجيني أثناء تغير شكل جينوم الجنين بعد تخطي نزع الميثايل عقب الإخصاب .واعادة برمجة العوامل الخارجية غير يكون نشط أثناء الحمل وأثناء تطور الورم الخبيث .وتوقيعات الجينات الخارجية المحرزة أثناء هذه المراحل ربما يكون لها تأثيرات طويلة الأمد وصدى على برامج التعبير الجينى .ولقد لوحظ أن الوجبة الغذائية والكحول وتناول الدخان والتعرضات السامة والإجهاد وغيرها لها تأثير كبير على صور الجينات الخارجية الديناميكية للخلايا وربما تظهر الميكانيكيات الفسيولوجية.

العوامل الخارجية غير الوراثية فى السرطان : Epigenetic in Cancer أصبح سرطان (CRC) colorectal cancerنموذج أصلى فى أبحاث العوامل الخارجية غير الوراثية المسببة للسرطان .فكان أول تقرير فحص سنة ,١٩٨٠اشار الى فقد ميثلة الحامض النووى DNAفى خلايا القولون المصابة بالسرطان .السمات الجزيئية العديدة المتغيرة فى صفاتها صنفت سرطان CRCوحددت مسارات متنوعة لهذا الورم الخبيث .نتائج هذا السرطان colorectal cancerالمستمدة من تراكم التعديلات الجينية والبيئية تقدح النمط المظهرى للورم الخبيث .كما أن السمات الجزيئية للجينات العديدة المقسمة لهذا المرض تحدد المسارات المختلفة المستخدمة فى هذا المرض .ولقد لوحظ أن الكروموسومات غير المستقرة فى % ٨٠ – ٧٠من المصابين بهذا المرض وتشمل مدى واسع من التعديلات الجينية التى من أمثلتها :تكرار تغير المواضع فى 5q , 17p ،and 18qالشطب ،فقد العديد من الزيجوتات وعدم إتزان عدد الكروموسومات المؤثرة على الكثير من الجينات الأساسية مثل SMAD4أو APC , KRASالتى تشجع تكوين الورم الخبيث وتقدمه.

وهذه التعديلات تحدث مبك ار وتنتج من خلل فى إصلاح ميكانيكيات الحامض النووى ،DNAوعدم إستقرار التيلومير telomereوفشل فى فصل الكروموسوم.

٢٠٢

ميكروبات القناه الهضميه والاستفاده من الغذاء

Gut Microbiota And Feed Utilization

تقوم الكائنات الحيه الدقيقه بدور اساسى فى تطور وصحه الثديات هذا الى جانب الدور الهام فى الاسماك وقد اوضح كثير من العماء دور هذه الكائنات فى الانسان الى جانب بعض الحيوانات ويتضح هذا الدور فى كثير من التخصصات وتشمل )الفسيولوجى -وتطور الجهاز المناعى- ومضادات السموم( وهناك بعض الكائنات الدقيقه لها دور فى افراز بعض الانزيمات اللازمه لعمليات تحلل بعض مكونات الغذاء غير المهضوم وتخليق بعض الفيتامينات .بالاضافة الى ذلك تقوم الكائنات الدقيقه الموجوده فى الامعاء بدور هام فى عملية هضم وتكسير الكربوهيدرات المعقدة التى تشمل الالياف وينتج عنها بعض الاحماض الدهنيه قصيرة السلسله الى جانب الدور الهام فى عمليات التمثيل الغذائى وكذلك الحماية من العدوى .ونظ ار للاهميه البالغه لميكروبات الامعاء للانسان والحيوان اجريت كثير من الدراسات فى الاونه الاخيره فى هذا السياق.

-١التعريف العام لميكروبات القناة الهضميه:

General Definition Of Microbiota And Microbiome:

عبارة عن تجمعات من الكائنات الحيه الدقيقه والتى تشمل البكتريا والفيروسات وبعض الكائنات وحيدة الخليه التى تعيش فى بيئه معينه وتعرف من الناحية الوراثيه على انها المادة الوراثية لكل من البكتيريا والفطريات والطفيليات والفيروسات -التي تعيش على وداخل جسم الإنسان.

-٢انواع واعداد الكائنات الدقيقه فى الانسان

Count And Diversity Of Microbiota In Human:

جسم الانسان ملئ بالكائنات الحيه الدقيقه حيث وجد بعض العلماء ان جسم الانسان يحتوى على ١٠٠-١٠ترليون خليه ميكروبيه.ويوضح جدول ) (٢٨الكائنات الحيه الدقيقه فى امعاء الانسان خلال دورة حياته وذلك تحت الظروف الصحيه حيث زيادة الميكروبات وتنوعها مع الزياده فى العمر حيث تصل الى اعلى معدل لها مع مرحلة البلوغ .وعلى الرغم من الاختلافات فى تنوع الميكروبات الى انها من الناحيه العمليه ثابته فى البالغين الاصحاء .ونجد تنوع الميكروبات فى

الاطفال الرضع اقل مقارنة بكبار السن.

ومعظم الكائنات الحيه الدقيقه توجد على امتداد القناه الهضميه وهى عبارة عن سلسله متصله من البكتريا تبدأ من ٣ ١٠-١١٠فى الجرام من محتوى المعدة والامعاء الى ١٢١٠فى القولون علاوه على ذلك يوجد اختلاف فى تركيب الميكروبات باختلاف هذه المواقع كذلك يوجد اختلاف معنوى بين الميكروبات التى تظهر فى تجويف المعده والميكروبات التى تكون ملتصقه فى طبقة المخاط

للجهاز الهضمى.

٢٠٣

Age

( الميكروبات الوجوده فى امعاء الانسان خلال دورة حياته٢٨) جدول

Phylum level microbial

composition (from the

most to the less

represented)

Infant (up to 2-3

years)

Actinobacterio,

Proteobacteria,

Firmicutes,

Bacteroidetes.

Adult

Firicutes, Bacteriodetes,

Actinobacteria,

Proteobacteria.

Elderly (>70

years)

Firmicutes,

Actinobacteria.

Bacteroidetes,

Proteobacteria.

Modifying factors

- Vaginal vs caesarian delivery.

- Gestational age.

- Infant hospitalization.

- Breast vs formula fed.

- Age at solid ffod introduction.

- Malnutrition.

- Antibiotic treatments.

- Diet.

- Hormonal cycles.

- Travel.

- Therapies.

- Illness.

- Lifestyle changes.

- Nutritional changes.

- Increased susceptibility to

Infection and inflammatory

diseases.

- Use of more medications.

وتختلف اعداد الميكروبات على المواقع المختلفه للقناه الهضميه حيث تكون قليله العدد فى المعده ( وعند اخذ عينه1A) وتصل الى ذروتها الى ان تصل الى القولون كما هو موضح فى الشكل ( علىBacilli, Firmicutes and Actinobacteria) من الامعاء الرفيعه وجدت غنيه بانواع (Bacteroidetes and the Lachnospiraceae family of the وجدت انواع،الجانب الاخر

.( شائعه فى القولونFirmicutes

الميكروبات الموجوده فى تجويف الامعاء يوجد فيها اختلاف معنوى كبير عن الميكروبات الملتصقه Clostridium, Lactobacillus, ) فى الطبقه المخاطيه فى الامعاء حيث تحتوى على انواع Bacteroides, ) ( بينما توجد انواع اخرى فى البراز وتشملand Enterococcus Bifidobacterium, Streptococcus, members of Entero bacteriacea, .(١٥) ( شكلEnterococcus, Clostridium, Lactobacillus, and Ruminococcus

٢٠٤

Spatial and temporal aspects of intestinal microbiota composition. A: (١٥) شكل variations in microbial numbers and composition across the length of the gastrointestinal tract. B: longitudinal l variations in microbial composition in the intestine. C: temporal aspects of microbiota establishment and maintenance and factors influencing microbial composition.

: طرق التعرف على ميكروبات القناة الهضميه-٣

Methods Of Identifying Gut (Microbiota):

meta ) هناك كثير من الطرق الحديثه المتاحه حاليا للتعرف على ميكروبات المعده وتشمل ( ويوضحtranscriptomic, meta proteomic and Meta (metabolomic) approache .(٢٩) الجدول التالى المقارنه بين هذه الطرق ومزايا وعيوب كل طريقه جدول

٢٠٥

( الطرق المختلفه للتعرف على ميكروبات القناه الهضميه٢٩) جدول

High-throughput

microbiome

sequencing

technology

165 RNA gene/165

DNAamplicon

analysis (e.g.454

pyrosequencing

lumina Miseq)

Microbial

material

Characteristies

/advantages

Limitations

Applications

gDNA

*fast cheap

sequencing

communities

*Revealing bacterial

diversity

*Detecting dysbiosis

*Microbia composition

dysbiosis

*Identifying heailthy

and disease-specitie

genera / species

Whole genome

shotgun

metagenomics

gDNA

Metatranseriptomies

mRNA

*High coverage deep

sequencing of the

total genes present

*No amplitication

bias kike 165

*Uncovering

microbial diversity

*Finding novel

genes

*Bioinformatic

screcning of host

sequences

*Obtaining gene

expression profiling

*Revealing differrnt

microbial gene

expression across

health diseaase and

different treatment

conditions

*Amplitication bias

*Taxonomic

information only

*Comparison of

results requires

amplication of same

region

*Expensive

*Requires highdepth coverage

*Assembly of

metagenomes

complicated due to

uneven coverage

*Bioinformatic

analyses complex

time –consuming

*No microbial

expressed functions

*Instability of

mRNA

*Multiple

purifieation steps

needed

*Lack of reference

databases

*No unique protocol

*Isolated and

transient picture of a

diverse and complex

community

Metaproteomics

Proteins

*Obtaining dynamic

microbiota protein

protiles

*Comparing

microbial patterns

across different

health disease and

treatment conditions

Metaboiomics

Metabolites

*Obtainirig

metabolic profiles

*Comparing

metaboiomes across

different disrase and

treatment conditions

*Technologically

challenging

*Hard to extract total

protein (interlering

compounds and

membrais/ malix

bound proteins)

*No unique protocol

*Biointormatic

analyses of protein

mass or suquences is

complex/timeconsuming

*Differentiating host

vs microbial

metabolite profiles

*Lack of reference

databases

*Nounique protocol

*Microbia composition

dysbiosis

*Finding diseasespecitic genes

*Identifying functional

based studies

*Revealing functional

dysbiosis

*Enrichment of

metagenomic data

*View of

transvriptionally active

/tunctional subset of the

genes under

investigation

*Confirming microbial

function

*Identifying eukaryotic

–prokaryot analogues

*To verity metagenomie

and metatranscripturrie

data

*Protein inference

linding protein coding

functional sequericus

and potuntial roles

*Identifying and

confirming new

microbiota and host

metabolic

pathways/responses

*Novel biomarker

discovery

دور ميكروبات الامعاء فى الاستفاده من الغذاء-٤ The Role Of Gut Microbiota And Nutrient Utilization:

تستمد ميكروبات المعده غذائها من عدة مصادر تشمل مكونات الاكل غير المهضومه مثل )الكربوهيدرات والبروتين والدهون( الى جانب بعض الخلايا والمخاط وتستخدم ميكروبات المعده هذة واثناء الاستفاده من هذة الركائز تقوم.الركائز لانتاج الطاقه اللازمه للعمليات الخلويه والنمو الميكروبات بانتاج العديد من نواتج التمثيل التى تكون مفيده للتمثيل الغذائى وصحة الانسان فعلى سبيل المثال عند تخمر الكربوهيدرات بواسطة الميكروبات تؤدى الى انتاج احماض دهنيه قصيرة السلسله تكون مفيده للانسان كذلك تخمر البروتين ينتج عنه مواد ايضيه فينوليه تكون مضرة K وتقوم ميكروبات الامعاء كذلك بانتاج بعض الجزيئات من الفيتامينات مثل فيتامين.للانسان . والتى قد تساهم فى تغذية الانسان من خلال امتصاصها من الامعاءBوبعض مكونات فيامين

٢٠٦

-١-٤دور ميكروبات الامعاء فى امتصاص العناصر المعدنيه :

The Role Of Gut Microbiota In Mineral Absorption:

هناك علاقه بين البكتريا من نوع lactobacliiوامتصاص ايون الحديد حيث تمتلك هذة البكتريا متطلبات نمو من اجل عنصر الحديد وبالتالى قد ينخفض عنصر الحديد فى بعض الافراد .على الجانب الاخر تنتج البكتريا التى تقوم بتخمر الكربوهيدرات بعض الاحماض الدهنيه قصيرة السلسله التى تقوم بدورها فى انخفاض درجة الحموضه فى القولون وبالتالى تحفز امتصاص الايونات ثنائية التكافؤ خلال انتقالها الى الاعور .وقد لوحظ ذلك فى حيوانات التجارب حيث يسهل امتصاص ايون الحديد فى القولون من خلال تخمر الكربوهيدرات بواسطة البكتريا التى تنتج حامض البروبيونك كما تساعد البكتريا lactobacliiفى تحول اللاكتات الى بربيونات فى انظمة التخمر وهذا يعطى تفسي ار منطقيا لوجود علاقه بين قلة بكتريا lactobacliiوانيميا نقص الحديد فى الدم.

-٢-٤ميكروبات الامعاء وتمثيل الدهون Gut Microbiota And Lipid Metabolism ميكروبات المعده وخاصة البكتريا lactobacliiلها القدرة على تحلل املاح الصفراء من خلال انتاج الانزيمات التى تحلل املاح الصفراء .وهذا يعمل على اعادة امتصاص املاح الصفراء فى الدورة الكبديه مما يؤدى الى زيادة فقد املاح الصفراء فى البراز وانخفاض الكوليستروك فى الدم نظ ار لتحول الكوليسترول الى احماض الصفراء .الميكانيكية الاخرى هى الفعل المثبط لحامض البروبيونيك بواسطه بكتريا الامعاء على انزيم ) (3-Hydroxy-3-Methyl Glutaryl-Coenzymeالمنشط للكبد

مما يؤدى الى انخفاض الكوليسترول فى الدم.

-٣-٤ميكروبات الامعاء وتمثيل البروتين:

Gut Microbiota And Protein Metabolism:

البروتين يتم تمثيله ميكروبيا فى القولون وتخمر البروتين يؤدى الى انتاج سلاسل متفرعه من الاحماض الامينيه وانواع من الفينولات وبعض نواتج التمثيل الاخرى التى قد تكون سامه للانسان.

تمثيل البروتين فى القولون يكون ذو تأثير معنوى فى مرضى الكبد وتؤدى نواتج التمثيل الميكروبى للبروتين الى ضرر بالكبد ويمكن تفادى ذلك بتوفير انزيمات تساعد على تخمر الكربوهيدرات مثل انزيم اللاكتوز لكى يتم تغيير صور نواتج تخمر البروتين الى صور اخرى لاتؤثر على الادراك.

-٤-٤تأثير الالياف الغذائيه على ميكروبات الامعاء:

Impact Of Dietary Fiber On The Intestinal Microbiota:

بدون ميكروبات الامعاء لايستطيع جسم الانسان الاستفاده من الكربوهيدرات غير المهضومه حيث تمتلك هذة الميكروبات انزيمات تقوم بتكسير هذة السكريات المعقده.

وتشمل الالياف الغذائيه اجزاء النباتات التى تحتوى الكربوهيدرات الذائبه وغير الذائبه والتى تشمل السيليلوز واللجنين والسكريات غير النشويه ) non-starch polysaccharides (NSPمثل )الهيموسيليلوز والبكتين والسكريات العديده( الى جانب بعض الالياف الاخرى مثل السكريات المعقده الغير مهضومه مثل )الانولين( بالاضافة الى النشا المقاوم )).(resistant starch (RS كل هذة المكونات تكون مقاومه للهضم فى الامعاء الرفيعه وتمر كما هى الى القولون حيث تزيد من لزوجة وكتلة البراز.وتقوم الميكروبات اللاهوائيه فى القولون بعمل تخمر للالياف الغذائيه وتنتج احماض دهنيه قصيرة السلسله مثل )البيوتيرك والاستيك والبروبيونيك( تكون مصدر للكربون الذى يستخدم للطاقه كما هو موضح فى شكل ) .(٢ونتيجة عملية التخمر تنخفض درجة الحموضه pH الى) ( ٦.٥ - ٥.٥وهذا يؤدى الى تثبيط نمو البكتريا الممرضه السالبه لجرام )السالمونيلا( وبكتريا القولون ).( Salmonella spp. and Escherichia coliكما تقوم جزيئات من حامض البيوتريك

٢٠٧

بالحمايه من التهاب القولون وسرطان القولون .وهذا بدوره يساعد على صحة الجهاز الهضمى من خلال نواتج عملية التخمر .والنظام الغذائى الحالى فى تغذية الانسان يحتوى على نسبة بسيطه من الالياف والكربوهيدرات على الرغم من الفوائد الصحيه الكبيرة للالياف الغذائيه لذلك تتجه كثير من الدول الى زيادة الالياف الغذائية فى غذاء الانسان وذلك للحد من الامراض التى تصيب المجتمع.

والتوصيات الحاليه من الولايات المتحده بالنسبة للاستهلاك الالياف ١٨جرام يوميا للفرد.

شكل )Schematic diagram illustrating the fate of dietary fiber and complex (١٦ polysaccharides in the large intestine, and the possible impact of increased fiber intake on gut transit and other parameters. Solid arrows indicate a direct effect, and

hashed arrows signify interlinked effects.

٢٠٨

-٥-٤دور ميكروبات الامعاء فى تمثيل الحامض الامينى تربتوفان :

The Role Of Gut Microbiota In Tryptophan Metabolism :

يوضح شكل ) (١٧مسار التخليق الحيوى لبعض المركبات الحيويه النشطه التى تنتج من تمثيل التربتوفان بواسطه بكتريا الامعاء .حيث تعمل البكتريا على الاندول الموجود فى التربتوفان .تقوم البكتريا من نوع ) (sporogenesClostridiumبتمثيل الاندول ويتحول الى ٣اندول بروبيونيك اسيد )3- ( (IPA)indolepropionic acidوالتى تعتبر مضادات اكسده عاليه لحماية الاعصاب.وقد اوضح بعض العلماء ان هذا المركب يرتبط مع بعض المستقبلات فى الامعاء ويتم امتصاصه وتوزيعه الى المخ حيث يكون له دور فعال فى الحمايه من مرض الزهايمر.بينما تقوم بكتريا من نوع ) (Lactobacillusبتمثيل التربتوفان الى اندول ٣الدهيد )( (I3A)indole-3-aldehyde حيث ان هذا المركب يكون له مستقبلات فى الخلايا المناعية للامعاء ويزيد من انتاج ) .( (IL-22)interleukin-22كذلك يمكن تمثيل الاندول فى الكبد وينتج مركب ) indoxyl (sulfateالذى يكون سام فى التركيزات العاليه ويكون مرتبط بامراض الاوعيه الدمويه والفشل الكلوى .ويمكن تقليل هذا المركب فى الدم عن طريق اخذ بعض المركبات التى تمتص الاندول مثل

)( .()activated charcoalAST-120

شكل )(Zhang and human gastrointestinal microbiotaTryptophan metabolism by (١٧

Davies, 2016).

-٥ميكروبات الامعاء والمناعة : Gut Microbiota And Immunity تقوم الكائنات الحية الدقيقه الموجوده فى امعاء الانسان بدور فعال فى تطورجزء من جهاز المناعه للانسان منذ مرحلة الميلاد وهو الجزء الخاص بكيفية الاستجابه للميكروبات بعد اول مواجهه ويؤدى الى دفاع سريع ضد الامراض .وقد وجد العلماء ان الفئران المريضه تكون خالية من

٢٠٩

الكائنات الدقيقه وبالتالى حدوث نقص فى تطور الجهاز المناعى للفئران.كذلك تمتلك الميكروبات مناعه للحمايه من التعرض المبكر للميكروبات المضره.

-٦ميكروبات الامعاء والسمنه : Gut Microbiota And Obesity تشارك ميكروبات الامعاء فى عملية التمثيل الغذائى لجسم الانسان بواسطة التوازن بين الطاقه وتمثيل الجلوكوز .وترتبط السمنه بالمستوى المنخفض من الالتهاب واضطراب عملية التمثيل ومرض السكر وتعتبر السمنه من الامراض الخطيره التى تؤثر على صحة الانسان والتى ترتبط باضطراب التمثيل الغذائى مثل مقاومة الانسولين ومرض السكر وامراض دهون الكبد وامراض الاوعية الدمويه والسرطان والربو والتهاب المفاصل والامراض العصبيه.

والسبب الرئيسى للسمنه هو عد م التوازن فى الطاقه الداخله وكذلك اضطراب العومل البيئيه ومن هذة العوامل الهامه التغذيه وميكروبات الامعاء حيث ان التغير فى تركيب او نشاط ميكروبات الامعاء تكون مرتبطه بامراض كثيرة مثل امراض التهاب الامعاء والسمنه ومرض السكر وامراض

الاوعية الدمويه.

هناك بعض ميكروبات الامعاء السائده فى امعاء الفقاريات وتمثل حوالى من %٩٠-٨٠وتشمل:

Bacteroidetes (e.g. genera Bacteroidesand Prevotella) and Firmicutes (e.g.

) (genera) Clostridium, Ruminococcus, Enterococcus and Lactobacillusكذلك ) Actinobacteria (e.g. genus Bifidobacterium) and Proteobacteria

).((e.g.GeneraHelicobacter and Escherichia

ومن الانواع الرئيسيه المهمه المرتبطه بالسمنه وهم ) (Firmicutes and Bacteroidetesوقد وجد العلماء ان الفئران السمينه يقل فيها البكتريا من نوع Bacteroidetesوزيادة فى البكتريا من نوع Firmicutesعند مقارنتها بالفئران النحيفه.توصل بعض العلماء ان الميكروبات المسئوله عن السمنه تزداد قابليتها على استهلاك الطاقه من الغذاء.

وقد توصل بعض العلماء الى تاثير ارتفاع دهن الغذاء على ميكروبات الامعاء حيث وجدوا انخفاض بعض انواع البكتريا مثل) Eubacteriumrectal-Clostridium coccoides group ( and Bifidobacterium sppفى الفئران السمينه عند تغذيتها على عليقه مرتفعه فى الدهن بينما لم تتأثر بعض الانواع الاخرى من الميكروبات مثل ) Lactobacilli/Enterococci and .(Bacteroidesولكن حتى الان لم يتم تحديد الانواع المتخصصه من الميكروبات الذى يسبب

او يمنع السمنه.

-٧دور ميكروبات الامعاء فى الحيوانات الاخرى

The Role Of Gut Microbiota In Other Animals:

الى جانب الدور الهام الذى تلعبة ميكروبات الامعاء فى الانسان هناك دور اخر لميكروبات الامعاء فى الحيوانات الاخرى مثل الاسماك حيث تعتبر الاسماك مهمه جدا فى تغذية الانسان وتعتبر ميكروبات الامعاء مهمه للاسماك لانها لها دور مهم فى صحة وجودة الاسماك البالغه.

-٨ميكروبات الامعاء فى الاسماك : Gut Microbiota Of Fish اثبتت بعض الدراسات التى اجريت على الاسماك وخاصة اخراجات الاسماك ان ميكروبات الامعاء تنحصر فى نوعين اساسين من البكتريا الاولى تعرف بالبكتريا غير الملتصقه والاخرى تعرف بالبكتريا الملتصقه او الاصليه.وتختلف الميكروبات باختلاف انواع الاسماك حيث نجد ان ميكروبات اسماك المياه العذبه تختلف عن ميكروبات اسماك المياه المالحه حيث نجد انواع الميكروبات الموجوده فى اسماك المياه العذبه الاتى) Aeromonas, Enterobacter,

٢١٠

(Pseudomonas, Micrococcus, and Bacillusموجوده فى الامعاء و اخراجات الاسماك مقارنة بالانواع الاخرى الموجوده فى اسماك المياه المالحه ومنها ) Pseudoalteromonas and (Vibrioفى الامعاء وبراز الاسماك بينما نجد النوع ) (Photobacteriumموجوده فى عينات

البراز فقط.

ويوضح شكل ) (١٨الاختلافات بين اسماك المياه العذبه واسماك المياه المالحه من حيث الميكروبات الهوائيه سواء الموجبه او السالبة لجرام التى تظهر فى القناه الهضميه.

شكل ):(١٨

Aerobic Gram-negative (A) and Gram-positive (B) bacterial species reported in the GI tract of marine and freshwater fish (Izvekova 2007).

بينما يوضح شكل ) (١٩ميكروبات الامعاء اللاهوائيه الموجوده فى امعاء الاسماك فى كلا من

اسماك المياه العذبه واسماك المياه المالحه.

٢١١