التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

الازوت الكلى لتقدير ميزان الازوت. تقدير ميزان العناصر المعدنيه. تقدير اليوريا والكرياتين. تقدير الحجم الكلى.** وتبعا لنوع التقدير يختلف نظام اخذ عينه البول-:

في التحليلات الوصفيه-:

تؤخذ عينة بول عشوائيه""Random

في التحليلات الكميه-:

١

يتم اخذ الحجم الكلى للبول خلال ٢٤ساعه ثم تؤخذ منه عينه تمثل

٢٠

أو ) (% ٢٠من الحجم الكلى لاجراء التقدير الكمى.

** اهم التغيرات التي تحدث في البول عند حفظه-:

يرجع التغير في مكونات البول إلى احد السببين الآتيين-:

فعل الكائنات الدقيقهMicroorganisms""-:

نتيجة تلوث العينه أو حتى تلك التي تنزل معه من الحيوان.) (٢الفقد بالتطاير"Volatilation "-:

لبعض المركبات مثل تطاير الامونيا ،لذلك يجب أن يجمع البول في وعاءنظيف و يحفظ في مكان بارد لمنع تطاير مكوناته.

ويفضل أن يجمع البول تحت التولوين حيث يعمل كسطح عازل Barirلمنعالتلوث بالبكتريا ومنع تطاير مكونات البول القابله للتطاير لذلك يفضل اجراء

التقديرات باسرع ما يمكن.

* التغيرات التي تحدث في عينة البول-:

-٨٨٦-

المواد الحاملة للطاقة "-التمثيل الغذائي للطاقة" -تمثيل الطاقة وعلاقته بالتغذية )ا( يرجع التاثير السيء للبكتريا إلى انها تفرز إنزيم اليوريز الذى يحمل اليوريا

إلى كربونات امونيوم.

ومثل هذا البول لا يصلح لتقدير الامونيا أو اليوريا أو .PH

"إنزيم اليوريز"

اليوريا كربونات امونيوم

"من كائنات البول الموجوده اصلا أو التلوث"

كذلك يمكن لهذه الميكروبات وبعض الفطريات والخمائر أن تحلل الجلوكوز.

ترسيب الفوسفات في الوسط القلوى.

في الجو البارد يحدث تجمع لجزيئات حامض اليوريك واليوريا في جزيئات كبيره )كريستالات( وتترسب في قاع الزجاجه ويمكن اعادة ذوبانها بتدفئه الزجاجه في حمام

مائى مع التقليب الجيد.

وعند الرغبه في تقدير الازوت الكلى في البول )لعمل ميزان الازوت( فانه يفضل جمع عينة البول في وجود حامض كبريتيك ) ١:١حيث يضاف ٥٠سم ٣في زجاجة الاستقبال مع وجود زجاجه اخرى )التى يؤخذ بها العينه للتيحليل(.يوجد بها

٢٠سم ٣تولوين لمنع تطاير الامونيا.

ووظيفة الحامض هو منع تطاير الامونيا لانه يربط النتروجين الكلى للبول في

صورة كبريتات امونيوم غير قابله للتطاير.

** حفظ عينة البول-:

ان طريقة حفظ عينات البول تعتمد على نوع التقدير ومن اكثر المواد الحافظه

استخداما ما يلى-:

حامض -:H2SO4

يستخدم حامض H2SO4

بتركيز ) (١:١اوحامض ٢) HCLع( بنسبة

٥٠سم ٣في اناء استقبال البول.

-٨٨٧-

التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

حيث يرتبط H2SO4مع الامونيا ويكون كبريتات امونيوم غير قابلة للتطاير وهي طريقه جيده لحفظ البول لتقدير اليوريا أو النتروجين الكلى أو الكالسيوم.

كما يمكن استخدام-:

الكلوروفورم -التولين – الثيمول – الفورمالين وان كان لهذه المواد بعض العيوب

منها.

التولوين -:يكون طبقه رقيقه على سطح البول مما يلوث الماصه المستخدمه في نقل البول ،ويمكن التغلب على هذا العيب بوضع البول في قمع فصل واخذ

الطبقه السفلى )البول(.

الكلورفورم -:له بعض العيوب حيث يتداخل مع بعض التقديرات مثل الجلوكوز

حيث يختزل محلول فهلنج.

* -الكلوروفورم يختزل محلول فهلنج وبالتالى يعوق تقدير الجلوكوز في البول.

– ٤الثيمول -:يمكن استخدامه في صورة بعض البلورات أو كمحلول بتركيز ١٠) %١٠جم ثيمول /تستكمل إلى ١٠٠سم ٣بكحول ايزوبروبانول(

ويكفي ٥سم ٣من هذه المحلول لحفظ لتر بول.

ويستخدم الثيمول في حالة تقدير كل من-:*الصوديوم.

*البوتاسيوم.

*البروتين.

*الكلوريد.

*الكرياتينين.

*الكتيونات.

– ٥الفورمالين -:يمكن استخدامه أو استعماله كمحلول بمعدل ٤ :٣ نفط١٠٠/مل ٣بول ويحذر زيادتة حيث يتداخل مع تقدير السكر.

-٨٨٨-

المواد الحاملة للطاقة "-التمثيل الغذائي للطاقة" -تمثيل الطاقة وعلاقته بالتغذية -٦حامض الاسكوربيك -:يستخدم كمحلول %١٠وكذلك يستخدم حمض

الخليك أو الميتانوفوسفوريك.

-٧وفي كل الاحوال اذا جمع البول بطريقة صحيحه بدون تلوث وحفظ بالتجميد فيعتبر كافيا لحفظ مكوناته دون تغير لفتره طويله.

* ملاحظه هامه -:الكميه في الجميع ) (%١٠ماعدا الفورمالين من ٤ :٣نقط.

عينات الروث Faces Samples

** تتكون عينة الروث من المكونات الاتيه-:

.١المواد المهضومه غير الممتصه.

.٢المواد الغير مهضومه التي مصدرها الغذاء

.٣المواد المفرزه من القناه الهضميه مثل) -:الانزيمات– الصبغات -

العصارات(.

.٤الخلايا المتساقطه من جدر الجهاز الهضمى وبعض كرات الدم

الحمراء.

.٥جدر البكتريا والبروتوزوا وبعض الطفيليات.

.٦الماء.

.٧المواد الغريبه الملوثه للطعام.

** طرق جمع عينة الروث-:

-١من صناديق الهضم -:جمع كمى خلال ٢٤ساعه لتقدير الموازين الغذائيه.

-٢من خلال اكياس الروث -:في الحيوانات التي ترعى أو الحيوانات الكبيره.

-٣اخذ عينه من المستقيم مباشرة.

** وتئخذ يوميا عينه ممثله نسبتها %١٠من كمية الروث التي اخرجها الحيوان خلال فترة الجمع )اثناء الدور الرئيسى(.

** طرق حفظ عينة الروث-:

-٨٨٩-

التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

بالتجفيف الاولى على°٧٠:٦٠م لمدة ٢٤ساعه.

التجميد وهي طازجه ياستخدام" "Deep Freezingولا تحفظ العينه في جو الثلاجه العادى حتى لا تصاب بنمو العفن وبعض الفطريات فتفسد العينه.

** بالنسبه لعينات زرق الدواجن حيث البول مختلط مع الروث-:

فيتم فصل البول عن الروث عن طريق-:

.١الطريقه الميكانيكية.

.٢الطريقه الكيمياوية.

.٣الطريقه الجراحية.

طرق الحصول على سائل الكرشRumin liquer:

ا -طريقة اللى المعدى Stomach Tube

ب -طريقة فتحة الكرش المستقيمه الصناعيه .Fistula

طريقة اللى المعدى-:

من مميزاتها -:انها لا تحتاج إلى اجراء جراحة للحيوان.

من عيوبها-:

-١احتمال تلوث العينه باللعاب )قلوى التاثير(.

-٢احتمال الحصول على عينه غير ممثله لسائل الكرش.

طريقة فتح الكرش الصناعيه-:

من مميزاتها-:

امكانية الحصول على عينه ممثله وبكميه كبيره.

لا يوجد احتمال لتلوث العينه باللعاب.

من عيوبها-:

تحتاج إلى اجراء جراحه للحيوان وقد يتسبب ذلك في تلوث الجرح خاصة

-٨٩٠-

المواد الحاملة للطاقة "-التمثيل الغذائي للطاقة" -تمثيل الطاقة وعلاقته بالتغذية

عند عدم الاهتمام بتطهيره بصفة مستمرة.

** اهم القياسات بسائل الكرش-:

-١حموضة الكرش")"PHحيث تقاس في الحال بعد اخذ العينه(.

-٢الامونيا) -:حيث تقاس في الحال بعد اخذ العينه(.

-٣الأحماض الدهنيه الطياره الكليه وتصنيفها ] [TVFA’s

Total Volatile Fatty Acids

Fraction Volatile Fatty Acids [FVFA’s] -٤

-٥الميكروفلو ار )بكتريا وبروتو از( العدد الكلى – تصنيفها – نشاطها.

-٦معدل التخمر""Fermentation Rate

** طرق حفظ سائل الكرش

يجب عند قياس أو تقدير كلا من الحموضة ال PHو الامونيا مباشرة دونحفظ أي بمجرد الحصول على العينة وذلك لسهولة حدوث تغير في قيمتها ولا يجب

تقديرهما بعد الحفظ

يمكن حفظ العينة بالتجميد freezingلاجراء تقديرات الأحماض الدهنيةالطيارة وتصنيفها ,أو في حالة الضغط الاسموزى والعناصر المعدنية.

-ففي حالة تقدير

] [TVFA’sالأحماض الدهنية الطيارة الكلية

يؤخذ ٢سم ٣سائل كرش مصفي) +SRL

٢سم ٣حامض اورثوفوسفوريك

مركز ١ +سم ٣حامض يدكل (Hclس (١٠/ثم حفظ العينة في الثلاجة لفترة محدودة أو في الديب فريزر لفترات طويلة لمنع تطاير تلك الأحماض ،ويتم الحفظ تحت تجميد لحين التقدير بجهاز ميكرو كلداهل البروتين.

-في حالة تقدير

" "FVFAوظائف الأحماض الدهنية الطيارة .

-يؤخذ عينة مقدارها ٥سم ٣من سائل الكرش المصفي SRL

١+سم ٣من

حامض الميتا فوسفوريك %٢٥ثم الطرد المركزى وفصل الجزء الرائق

-٨٩١-

التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

supernatantويوضع في زجاجة بنسلين ويوضع في الثلاجة أو الديب فريزر حسب مدة الحفظ لحين القياس بإستخدام جهاز . GLC في حالة تقدير قياسات الميكرو فلو ار: تحفظ العينة بإستخدام (١محلول فورمالين (٢ .%١٠محلول اليود .لوقف نشاط الميكروبى )الميكرو فلو ار( بمجرد الحصول على العينة.

معدل التخمر Fermentation rateزجاجة ال In vitro

+جهاز البلانوميتر

عينات الدمBlood Sample :

** وقت اخذ العينة

حسب نوع الدراسة والهدف منها والتقديرات التي تتم عليها وهناك عينات تؤخذ قبل التغذية أو اعطاء المعاملة وتسمى غالبا بال Zero timeوالباقى على فترات Intervalsقد تكون 2,4, and 6 hrsأو غيرها .

** مكان اخذ العينة:

الوريد الوداجى في الماشية والاغنام والماعز والجمال وريد الاذن أو من الذيل في الفئران وريد الجناح أو العين )مقابل الملتحمة( في الطيور وريد الاذن في الارانب* تؤخذ عينة الدم من مناطق مختلفة من الحيوان

طرق اخذ العينة (١سرنجة طبية نظيفة

(٢الانبوبة المفرغة

(٣الانابيب الشعرية )الهيما توكريت(

(٤الذبح العادى

-٨٩٢-

المواد الحاملة للطاقة "-التمثيل الغذائي للطاقة" -تمثيل الطاقة وعلاقته بالتغذية ملاحظات هامة-: (١الانابيب المفرغة Evacuated tubeحيث ضغط الهواء بداخلها اقل من الضغط داخل الوريد فيتدفق الدم اليها بسرعة وسهولة وهذه الانابيب في الغالب

تحتوي على الهيبارين.

(٢بعد الحصول على عينة الدم الكامل يأتى القرار بفصل البلازما أو تركه يتجلط لفصل السيرم أو الحفاظ عليه كما هو والفيصل في اتخاذ هذا القرار هو نوع التقديرات المراد اجرائها فبعضها يتم في الدم الكامل واخرى تتم في السيرم وثالثة في

البلازما.

** مكونات الدم-:

(١المكونات الخلوية:

عند ترك الدم الكامل يتجلط ينفصل سائل شفاف رائق تتكون جلطة أو خثرة Clotفالجزء الرائق يمثل السيرم اما الجلطة )المكونات الخلوية( تتكون من:

كرات الدم الحمراء +كرات الدم البيضاء +الصفائح الدموية +الفيبرينوجين +الثرومبين +فيتامين ك +عنصر الكالسيوم.

(٢بلازما الدم:

تحتوى على الفيبرين حيث يضاف إلى الدم مضاد للتجلط Anti coagulst فلا تتكون الجلطة وبالطرد المركزى يمكن فصل البلازما )سائل اصفر اللون( يحتوى

على السيرم +بروتين الفيبرين.

س :ماهو الفرق بين السيرم والبلازما ؟ السيرم يحتوى على المكونات الخلوية فقط البلازما تحتوي على المكونات الخلوية و بروتين الفيبرين )السيرم +الفيبرين(* ويأتى في هذا المقام شرح كيفية تكوين الجلطة الدموية ..كيفية تكوين

الجطلة الدموية ؟

-٨٩٣-

التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

Mechanism of Clot formation

Prothrombinase

Prothrombin

thrombin

Vit K

Prothrombinogen

Ca ++

Liquid blood protein

Solid Protein

Fibrin = Blood Clot

""Liver

ويجب أن تكون عينات كلا من البلازما والسيرم خالية من اللون الاحمر الذى يدل على تكسر كرات الدم الحمراء Hemolysisويرجع حدوث هذا التحلل نتيجة لاحد

هذه الاسباب:

(١زيادة كمية مانع التجلط في حالة الرغبة في فصل البلازما (٢التناول الخاطئ لعينة الدم )كأن ترج بشدة قبل الفصل( تتكون الخثرة أو الجلطة خلال ساعتين من سحب العينة لذلك يجب عمل التقديرات اللازمة خلال خمس ساعات من جمع العينة والا فيجب حفظها عىل درجة ح اررة من °٤: ٢م لمدة ٢٤ساعة واذ لم يتم التقدير خلال ٢٤ساعة فيجب حفظها بالتجميد على درجة ح اررة لاتزيد عن – ١٢م ثم يجرى لها اسالة thowingعلى درجة ح اررة °٤٥: ٣٧م في حمام مائى ولا تزيد الدرجة عن ذلك حيث قد تؤدى إلى التغير في طبيعة البروتينات Denaturationوبالتالى صعوبة تقديرها.

** مضادات موانع التجلط Anti coagulants

(١الهيبارين Heparin

هي اكثر المواد المانعة للتجلط استعمالا حيث يقوم بتثبيط تكوين الثرومبين من البروثرومبين ولا يؤثر على مكونات الدم لانه يوجد به طبيعا في جسم الانسان

والحيوان ويستخدم الهيبارين بنسبة:

٢مجم ١٠ /سم ٣دم )نقطة على جدار الانبوبة وترج جيدا لتوزيعها(

-٨٩٤-

المواد الحاملة للطاقة "-التمثيل الغذائي للطاقة" -تمثيل الطاقة وعلاقته بالتغذية (٢اكسالات الصوديوم والبوتاسيوم Na and K Oxalate تقوم بالتفاعل مع الكالسيوم وترسبه وهي اكثر استخداما في صورة اكسالات بوتاسيوم لانها اكثر ذوبانا وتستعمل بمعدل ٢٠ -١٠:مجم ١٠ /سم ٣دم وتستخدم في صورة مسحوق أو يحضر محلول % ٣٠ثم تعادل وتضبط درجة الحموضة لتصبح PH = 7.4بإضافة NaoHثم يؤخذ ,١سم ٣لكل ١٠سم ٣دم

(٣مخلوط من اكسالات الامونيوم والبوتاسيوم:

يستخدم بنسبة ٣:٢ويضاف للانبوبة بمعدل ٢مجم ١٠/سم ٣دم ولايجب استخدام اوكسالات الامونيوم في أي تقدير خاص بالنيتروجين حتى لا يحدث تداخل بين كلا من نيتروجين العينة ونيتروجين اوكسالات الامونيوم.

(٤سترات الصوديوم

السترات لاترسب الكالسيوم Ca++ولكن تحوله إلى صورة غير ايونية )يرتبط

بالسترات فلا يصبح ح ار فلا تتكون الجلطة(

(٥كلوريد الصوديوم:

يستخدم بمعدل ١٠٠مجم١٠/سم ٣دم ولا يستخدم في حالة تقدير الانزيمات

" EDTA " (٦

Ethylin Di-amin Tetra Acetic Acid

** أهم التقديرات التي تتم على الدم:

(١اولا:تقديرات تتم في الدم الكلى

-الامونيا

-الكربوكس هيموجلوبين

-الهيموجلوبين

-الجلوكوز

-اللكتات

-الرصاص

النتروجين الكلى -البيروفات -اليوريا

المكوانت الخلوية الكلية )الهيماتوكريت( أو يطلقعليها ""PCV

Packed cell Volume

-٨٩٥-