التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

** تقدير رماد اللبن

يتم وزن بوتقة احتراق فارغة وبها قصاصات من ورق الترشيح يوضع ١٠سم ٣لبن ثم يتم وزن البوتقة وبها اللبن )ثم حساب وزن اللبن( يتم الحرق بالبوتقة ومحتوياتها في فرن احتراق ثم التجفيف على °٦٠م ثم حساب النسبة المئوية للرماد** تقدير المادة الجافة )الجوامد الكلية( ) Total Solid (T.Sبالوزن العادى

باستخدام القانون ج = ١٠٠))٢,٦٦٥+١,٢ث/(١٠٠-ث(

اوباستخدام القانون ج = ١,٢د+درجة اللبن٠,٢٥+٤/ لإيجاد درجة اللبن لابد من معرفة كثافة اللبن فمثلا كثافة اللبن ١,٠٣١٥

اذا درجة اللبن ٣١,٥

**تقدير بروتين اللبن Tp

يتم التقدير بطريقة مايكرو كلداهل أو طريقة كلداهل العادية

)هضم العينة من ٥ :٤جم لبن(

تقطير

معايرة

بضرب الازوت × ٦,٤

بقرى ٣,٨

٣,١

كازين

٠,٧

البيومين وجلوبيولين

جاموسة ٤,٥

٣,٦

كازين

٠, ٩

البيومين وجلوبيولين

Fibrin = Blood Clotالجوامد اللادهنية = الجوامد الكلية %-للدهن

-٩٠٦-

المواد الحاملة للطاقة "-التمثيل الغذائي للطاقة" -تمثيل الطاقة وعلاقته بالتغذية

الجوامد اللادهنية = ج % -د

* تقدير لاكتوز اللبن

%للاكتوز = ج %) -للدهن % +للبروتين % +للرماد(

** حفظ عينة اللبن:

بالبسترة.

بالتجميد ثم الإسالة في حمام مائى.

دراسة نشاط الإنزيمات

التمثيل الغذائي:

بناء – هدم )خطوتان متلازمتان(.

نواتج عمليية الهدم لها تأثير ضار إذا زاد تركيزها )من الممكن أن تسبب سمية( فلابد من التخلص من هذه المركبات السامة.

أهم الطرق الموجودة في الجسم للتخلص من المواد الضارة هي الإنزيمات

مثال توضيحى:

H2O + O2

H2O2

إنزيم الكتاليز يقوم بتكسير هذه المادة )التى لها تأثير ضار( إلى ماء و

أوكسجين

2H2O + O2

أى تفاعل إنزيمى لكى يتم يلزم له ثلاث شروط:

-١معرفة الإنزيم نفسه.

-٢معرفة مادة التفاعل.

-٣معاون الإنزيم.

-٩٠٧-

2H2O2

التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

قارن بين التفاعل الإنزيمى والتفاعل الكيماوى:

وجه المقارنة

التفاعل الكيماوى

التفاعل الإنزيمى

مادة التفاعل

بمجرد إنتهائها يتوقف التفاعل

التفاعل مستمر لفترة طويلة لأن الإنزيم مادة

أساس التفاعل

على أساس الأوزان المكافئة

حيوية

على أساس قوة الإنزيم ) ١مول إنزيم كتاليز

يقوم بتكسير ٥مليون مول من H2O2على

درجة صفر مئوى(

دراسة نشاط الإنزيم:

لكي يتم دراسة نشاط الإنزيم يتم الحصول على مستحضر الإنزيم ويضاف لمادة التفاعل ثم ننتظر حتى يظهر الإنزيم أثره.

الإنزيم يقوم بتكسير مادة التفاعل.

يتم المعايره بالبرمنجانات قبل وبعد عمل الإنزيم

بخمس دقائق.

قراءة السحاحة قبل عمل الإنزيم= ٧سم.

قراءة السحاحة بعد عمل الإنزيم= ٤سم.

اذن نشاط الإنزيم= ٣ =٤ -٧سم.

تعريف نشاط الإنزيم:

هو عباره عن الجزء الذي قام الإنزيم بتكسيره من مادة التفاعل.

لكي يتم نشاط الإنزيم يلزم لذلك عدة تحضيرات أو مستحضرات )المستحضرات

الانزيمية أو الكيماوية(.

-٩٠٨-

المواد الحاملة للطاقة "-التمثيل الغذائي للطاقة" -تمثيل الطاقة وعلاقته بالتغذية

-١مستحضرات الإنزيم:

ا ( يتم اخذ عينة من كرات الدم الحمراء.

ب( غسل الاصبع الابهام بقطنة مبللة بالكحول.

ج( يتم احضار دبوس ابرة ويتم تعقيمه جيدا ثم يتم عمل شق في الاصبع

الابهام.

د ( يتم جمع ٢نقطة من الدم على الابهام يتم سحب الدم بماصة الدم.

ه( يضاف الدم الموجود بالماصة في انبوبة اختبار مملوءة بالماء المقطر وترج الانبوبة جيدا وبالتالي اصبح لون الانبوبة احمر لوجود كرات الدم الحمراء.

و( اذا ترك في الجو العادي والح ارره مرتفعة يفسد الإنزيم وبالتالي يتم احضار كاس وبة قطع ثلج مجروش ليحتفظ الإنزيم بدرجة ح اررته.

-٢مادة التفاعل:

فوق اكسيد الهيدروجين H2O2بتركيز%٠,٢٤

H2O2بتركيز %٣٠لكي يتم عمل منها محلول بتركيز %٠,٢٤من H2O2

) ٨سم في لتر ماء مقطر(.

-٣حامض الكبريتيك:

بتزكيز ٢عياري وهو يستعمل لوقف نشاط الإنزيم.

-٤برمنجنات البوتاسيوم

تركيزها س.٢٠/

العوامل المختلفة التي تؤثر على نشاط الإنزيم:

-١تركيز الإنزيم

-٢تركيزمادة التفاعل

-٣درجة الح اررة

-٤الوقت

-٩٠٩-

التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

-٥درجة ال PH

-٦تأثير المثبط الإنزيمى.

-١تركيز الإنزيم:

يتم إحضار ٦أنابيب إختبار ويضاف في كل أنبوبة ٢سم من مادة التفاعل .H2O2 الأنبوبتين رقم ٦ ،١لا يضاف إليهم الإنزيم لأنهم يعتبروا بلانك للمعايرة.

الأنابيب الباقية:

٢يضاف إليها 1⁄2 سم من الإنزيم.

٣يضاف إليها ١,٠سم من الإنزيم.

٤يضاف إليها ١,٥سم من الإنزيم.

٥يضاف إليها ٢,٠سم من الإنزيم.

بعد إضافة الإنزيم تترك الأنابيب لمدة ٥دقائق.

يتم إضافة ٢سم حامض كبريتيك لإيقاف نشاط الإنزيم.

تتم المعايرة ببرمنجنات البوتاسيوم س ٢٠/للأنابيب وحساب نشاط الإنزيم.

-٩١٠-

المواد الحاملة للطاقة "-التمثيل الغذائي للطاقة" -تمثيل الطاقة وعلاقته بالتغذية يتم وضع النتائج في جدول وتسجل النتائج وطريقة الحساب:

H2O2

1

2

3

4

KMnO4

6.0

5.0

4.0

3.0

2.0

H2SO4

2

2

2

2

2

6.0

2

Enzyme

0.5

1.0

1.5

2.0

-

H2O2

2

2

2

2

2

Tube no.

1

2

3

4

5

2

6

من الجدول يتضح أن نشاط الإنزيم يزداد بزيادة تركيز الإنزيم.

-٢تركيز مادة التفاعل:

يتم إحضار ٦أنابيب إختبار.

٢ ،١يوضع بهم ٢سم من مادة التفاعل . H2O2

٤ ،٣يوضع بهم ١سم من مادة التفاعل ١ + H2O2سم ماء مقطر.

٦ ،٥يوضع بهم 1⁄2 سم من مادة التفاعل ١,٥ + H2O2سم ماء مقطر.

كل زوج من الأنابيب :الأنبوبة الأولى لا يوضع بها إنزيم والثانية يوضع بها

1⁄2سم إنزيم

بعد إضافة الإنزيم تترك الأنابيب لمدة ٥دقائق.

يتم إضافة ٢سم حامض كبريتيك لإيقاف نشاط الإنزيم.

تتم المعايرة ببرمنجنات البوتاسيوم س ٢٠/للأنابيب وحساب نشاط الإنزيم.

-٩١١-

التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

يتم وضع النتائج في جدول وتسجل النتائج وطريقة الحساب:

H2O2

4

3

2

KMnO4

6.0

2.0

5.0

2.0

3.0

1.0

H2SO4

2

2

2

2

2

2

Enzyme

0.5

0.5

0.5

Tube no. H2O2 H2O

1

2

2

2

3

1.0

1

4

1.0

1

5

1.5

0.5

6

1.5

0.5

من الجدول يتضح أن نشاط الإنزيم يزداد بزيادة تركيز مادة التفاعل.

-٩١٢-

المواد الحاملة للطاقة "-التمثيل الغذائي للطاقة" -تمثيل الطاقة وعلاقته بالتغذية

-٣درجة الحرارة:

الهدف من دراسة تأثير درجة الح اررة:

الوصول لدرجة الح اررة المثلى التي يكون نشاط الإنزيم فيها أعلى ما يمكن ،وتتم التجربة في درجات حرارة أعلى وأقل من درجة ح اررة الغرفة وتتم التجربة كما يلى:

يتم إحضار ٨أنابيب إختبار وتقسم إلى ٤أزواج ) ٤مجموعات(:

يتم وضع الأنبوبتين ) (٢) ،(١على درجة ح اررة الغرفة.

يتم وضع الأنبوبتين ) (٤) ،(٣في درجة ح اررة °١٥م.

يتم وضع الأنبوبتين ) (٦) ،(٥في درجة ح اررة °٤٠م.

يتم وضع الأنبوبتين ) (٨) ،(٧في درجة ح اررة °٦٠م.

بعد ضبط درجة الح اررة في جميع الأنابيب تضاف مادة تفاعل بمقدار ٢,٠سم.

في كل زوج من الأنابيب نجعل أنبوبة مقارنة Controlلا يوضع بها إنزيم

والأخرى يضاف بها 1⁄2 سم من مستخلص الإنزيم.

بعد ٥دقائق يضاف ٢سم من حامض الكبريتيك على جميع الأنابيب.

تتم المعايرة ببرمنجنات البوتاسيوم ثم تسجل قراءة السحاحةويتم تسجيل القراءات

-٩١٣-

التمثيل الغذائي للمواد الحاملة للطاقة

في جدول .يتم وضع النتائج في جدول وتسجل النتائج وطريقة الحساب:

H2O2

KMnO4

H2SO4

Enzyme

H2O2

Temp.

4

6.0

2.0

5.0

3.0

4.0

3.0

3.0

2.5

2

2

2

2

2

2

2

2

0.5

0.5

0.5

0.5

2

2

2

2

2

2

2

2

Room

Room

15

15

40

40

60

60

2

1

0.5

Tube

no.

1

2

3

4

5

6

7

8

من الجدول يتضح أن أفضل نشاط للإنزيم في درجة ح اررة الغرفة حيث أن أعلى أو أقل منها قد يحدث موت أو قلة نشاط الإنزيم.

-٤الوقت )الزمن(:

كلما زادت الفترة كلما قل معدل التفاعل وبالتالى يقل نشاط الإنزيم.

يتم إحضار ٥أنابيب إختبار ونضع بهم ٢سم من مادة التفاعل:

الأنبوبة الأولى لجعل الوقت صفر يتم إضافة حامض الكبريتيك أولا ثم إضافة

1⁄2 سم من الإنزيم.

باقى الأنابيب ) (٥) ،(٤) ،(٣) ،(٢يتم إضافة الإنزيم أولا ثم إضافة الحامض.

تتم المعايرة وأخذ القراءات وتسجيلها في الجدول.

-٩١٤-

المواد الحاملة للطاقة "-التمثيل الغذائي للطاقة" -تمثيل الطاقة وعلاقته بالتغذية يتم وضع النتائج في جدول وتسجل النتائج وطريقة الحساب:

H2O2

KMnO4

H2SO4

Enzyme

2

1

0.8

0.7

Time

minute

H2O2

10.0

2

0.5

2

0

8.0

7.0

6.0

5.0

2

2

2

2

0.5

0.5

0.5

0.5

2

2

2

2

1

3

5

7

Tube

no.

1

2

3

4

5

من الجدول يتضح أن معدل نشاط الإنزيم يقل بزيادة الوقت.

-٥درجة ال :PH

نحضر محاليل مختلفة من ال PHمن الوسط الحامضى والقلوى.

يتم إحضار ماء مقطر ال PHله = ) ٧متعادل(.

يتم إضافة حامض على الماء ويقاس ال pHبجهاز ال PH meterثم يتم عمل محاليل مختلفة من ال PHبإضافة كميات مختلفة من الحامض.

يتم إضافة قلوى على الماء ويقاس ال PHبجهاز ال PH meterثم يتم عمل محاليل مختلفة من ال PHبإضافة كميات مختلفة من القلوى.

يتم إحضار ٨أنابيب إختبار وتقسم الأنابيب إلى مجاميع )كل مجموعة تحتوي

على زوج من الأنابيب(.

يتم إضافة مادة التفاعل والإنزيم ثم إضافة حامض الكبريتيك والمعايرة.

-٩١٥-