صناعة الدواجن المتكاملة 1

ومن جهة أخري يجب التركيز علي تقييم أمان الأغذية والأعلاف المشتقة من النباتات

وكذلك المحاصيل المعدلة وراثيا.

يجب تعرض الغذاء والعلف المعدل وراثيا الي المزيد من تقييم الأمان .والحصيلة المختلفة

للطريقة المقارنة يمكن بحثها.

التكافؤ الجوهري يمكن تحقيق لنظائر المحاصيل التقليدية ،والحاجة لمزيد من

الاختبار يجب ان تبحث حالة بحالة.

يمكن تحقيق التكافؤ الجوهري باستثناء صفات خاصة قليلة للمحصول المعدل وراثيا، بحيث يجب التركيز علي المزيد من تقييم الأمان وخاصة لهذه الصفات وأن يتضمن إختبار الأمان حالة السمية والحساسية وتحليل التأثير الغذائي للعلف أو

الغذاء المعدل وراثيا.

لا يمكن تحقيق التكافؤ الجزئي والكلي علي اساس حالة بحالة ،كما يجب تقييم

صحة وسلامة الغذاء والعلف

باستخدام طريقة مناسبة تشمل الناحية الغذائية

والسمية.

الخاصية الجزيئية : Molecular characterization

وصف المادة الوراثية المستخدمة في التحويل :

كل نواقل الجينات Vectorsالمستخدمة في التحويل تمد بقائمة )وجدول يلخص الأسم،الوضع ووصف مختصر( لكل العناصر الوراثية مشتملة السلاسل المشفرة وغير المشفرة ولكل من هذه العناصر يجب أن يتضمن الوصف:

وصف العنصر الوراثي أو ذكر مكان عزل العنصر الوراثي وصفاته.

نسبة وحجم العنصر الوراثي الذي دخل في الناقل الجيني Vector معلومات عن مصدره .ويجب اعطاء الإسم العلمي والتجاري للكائن المانح .ويجب وصف تاريخ استخدام الكائن المانح وصلته الوثيقة بتقييم المخاطرة .واستبيان اذا ما كان الكائن المانح مسئولا عن أي مرض او إصابة النباتات أو الكائنات الأخري مثلا :ينتج سموم وعوامل تسبب حاسية أو عوامل تسبب الإصابة بالأمراض.

٣٤١

معلومات عما إذا كانت العناصر الوراثية مشفرة من أجل استخدامها في انتاج بروتينات مسئولية عن مرض او إصابة النباتات او الكائنات أخري معلومات عن الصفات الجزيئية والكيموحيوية والفسيولوجية لمنتجاته كما هو معروف في الكائن المانح وتهدف الي النبات المنقول وراثيا.

وصف الموضع الجيني :Description Of The Transgene البيانات التجريبية يجب أن تتضمن عدد المواقع التي يستخدم فيها جزء من الحامض النووي DNAفي عملية التحول ويجب توضيح اذا ما كان مكانه في النواه الميتوكوندريا والكلوربلاست وبالنسبة للنباتات allopolyplordيجب توضيحه داخليا حيث تظهر الجينات الأبوية .ويجب وصف الطرق المستخدمة وتقييم حساسيتها.

لكل موضع ادخال insertionيجب ان يمد الناقل الجيني notifierبسلسلة الادخال الكامل لكل المناطق الجانبية flanking regionsويجب وصف العناصر الوراثية المختلفة وكذلك اي اعادة ترتيبات علي الصورة الموصفه لموضع نقل الجينات .فحص طبيعة السلاسل الجانبية باستخدام أدوات المعلومات البيولوجية .تقييم وجود وفاعلية هياكل قراءة

مفتوحة جديدة.

النسخ وصفات البروتين Transcript and protein characterization للتعبير عن الأشكال المقروءة المفتوحة في النبات المنقول وراثيا تزود البيانات علي المستويات والفضائيات والخصوصية المؤقته للتعبير عند مستوي البروتين .وفي حالة كون الهدف والتحول لتغيير تعبير الجينات الداخلية فإن البيانات يجب ان تشتمل علي تعبير الهدف .ومن أجل جميع الجينات الأخري الموجودة علي الحامض النووي DNAالمستخدم للتحول والداخل في المادة الوراثية Geneomeللنبات المنقول وراثيا يراعي تزويد البيانات عن المستويات ونسيج معين للتعبير عند النسخ ومستوي البروتين.

يجب تزويد بيانات عن المستويات ونسيج معين للتعبير عند النسخ ومستوي البروتين في حالة حدوث نسخ ويجب أن تقدر اذا تم ترجمة النسخ .كما يجب وصف صفات البروتينات التي يعبر عنها في النباتات او البروتينات المستهدفة التي تم تعديل مستوي التعبير.

٣٤٢

لو كان هناك تعديل للحامض النووي DNAيؤثر علي تعاقب )تسلسل( الأحماض الأمينية للبروتين المعبر النباتي يجري امداد لتعاقب الاحماض الامينية المعدلة

الوراثة والثبات : Inheritance and stability

يجب امداد البيانات الاحصائية المعنوية التي تقيم نمط الوراثة والثبات للتعاقبات المدخله وخاصة التي تقيم ثبات تعبير جميع البروتينات التي يعتزم التعبير عنها في النبات او في البروتينات المستهدفة التي تم تعديل او تغيير مستوي التعبير فيها.

اكتشاف ومطابقة : Detection and identification يراعي امداد تعاقب الزوج الأول Primer Pairالذي يمكن من مطابقة مماثلة حدث التحول ولا سيما البروتوكول التفصيلي لاستخدامه من أجل المطابقة والاكتشاف والاهداف

الكمية.

ويجب تقييم الأعلاف المحتوية على محاصيل معدلة وراثيا من حيث الآمان عند إستخدامها فى تغذية الحيوانات والتى تشمل تقييم الحساسية وتقييم السميه وتقييم التركيب الكيماوي.

-١تقييم الحساسية : Allergenicity assessment

تعرف الحساسية بأنها القدرة علي اظهار استجابة الحيوان لمناعة IgEأو مناعة الإنسان، وجميع البروتينات المعبرة الجديدة في النباتات المعدلة وراثيا تتواجد في الغذاء النهائي المقدم للإنسان أو العلف أو الذي يستهلكه الحيوان يجب أن تقييم من حيث أنها تسبب الحساسية .وضرورة اختبار حساسية الكائنات المعدلة وراثيا للأستهلاك الآدمي تدعم بواسطة امكانية البروتين المنقول وراثيا في المنتجات الحيوانية من أجل الاستهلاك الأدمي والتي من أمثلتها اللبن أو البيض .وحاليا ،لا يوجد اختبار واحد محدد يعتمد عليه للتنبؤ باستجابات الحساسية في الإنسان للبروتين المعبر عنه الجديد ومن ثم يوصي بنظام متكامل كل حالة علي حدة لتقييم حساسية البروتينات المعبر عنها expressedالجديدة .وهذا النظام يأخذ في الاعتبار الشواهد المستمدة من الأنماط العديدة للمعلومات والبيانات.

٣٤٣

استراتيجية التقييم : Assessment strategy

الخطوات الأولي في تقييم الحساسية لأي بروتينات معبرة عنها جديدة هي تقدير مصدر البروتين المقدم ،أي تشابه معنوي بين تكرار الأحماض الامينية للبروتين المسبب للحساسية وخواصه البنائية والتي تتضمن القابلية للتحلل الانزيمي والثبات عند المعاملة بالح اررة او

الحامض.

نظ ار لعدم وجود اختبار واحد للتنبؤ بخطورة استجابة الانسان IgEللتعرض عن طريق الفم فإن الخطوة الأولي لوصف البروتينات الجديدة المعبرة يجب ان تكون هذه المقارنة لتكرار الحامض الاميني والصفات الكيموفيزيقية للبروتين الجديد المعبر مع مثيلاتها المسببة للحساسية .وهذا يتطلب عزل أي بروتينات جديدة معبرة من النبات المعدل وراثيا او تخليق او انتاج مادة من المصدر البديل .ويراعي اختيار العائل لأن التعديلات المنقولة تسمح عوائل مختلفة ربما يكون لها تأثير علي الحساسية الممكنة للبروتين.

يجب معرفة المصدر الذي يسبب تفاعلات الحساسية كما يراعي بأن الجينات المستمدة من المصادر المعروفة للحساسية مفرتضة لكي اذا لم يقييم دليل علمي من ناحية أخري.

لا يكمن اخذ مستوي البروتين في الغذاء كمصنف لتقييم الحساسية .والسبب الأول هو عدم وجود أدني مستوي معنوي مقدر للتعرض للحساسية .كما أن لا يمكن لأحد أن يتأكد بأن مستوي التعبير للبروتين transgene encodeيزيد تحت ظروف

معينه )مناخيه،

تربة (...،ولذلك تصبح الحياة مهددة للحساسية بصور مستقلة.

التقييم الأولي : Initial assessment

مصدر البروتين : Source of the protein

نظ ار لأن جزء من البيانات المدعمة لأمان الأغذية مستمدة من النباتات المعدلة وراثيا فإن المعلومات يجب أن تحتوي علي أي تقارير للحساسية المرتبطة بالكائن المانح .ويراعي ايضا تحديد مصادر الحساسية للجينات مثل هذه الكائنات من أجل

الدليل المعقول

للحساسية المتوسطة IgEالذي يكون متاحا بعد استنشاق الهواء أو إحتكاك الجلد مع أي جزء من الكائن والإلمام المعرفي بمصدر البروتين المدخل يسمح بمطابقة الأدوات والبيانات

٣٤٤

السائدة واخذها في الاعتبار في تقييم الحساسية ومن أمثلة هذه البيانات توفر Seraمن أجل عرض الأهداف علي شاشة التلفزيون ،النموذج الموثق وخطورة وتأثير تفاعلات الحساسية والصفات الفيزوكيماوية والصفات المناعية لبروتينات الحساسية من ذلك المصدر تكرار الأحماض الامينية : Amino acid sequence homology الغرض من مقارنة تكرار Homologyهو تقدير المدي الذي يكون فيه البروتين الجديد المعبر متجانسا في سلسلة للحساسية المعروفة )غذاء ،تنفس أو أي نمط اخر( وهذه المعلومة ربما تقترح اذا ما كان هذا البروتين له تأثير للحساسية.

-٢تقييم السمية للنباتات المعدلة وراثيا

Toxicological assessment of genetically modified plants:

يمكن تعديل وتغيير النباتات المعدلة وراثيا من أجل الصفات الزراعية مثل تحمل الفيروسات والحشرات ومبيدات الأعشاب ومن أجل صفات الجودة مثل تحسين الصفات الغذائية .وربما ينتج عن ادخال جينات داخل النبات تخليق مواد جديدة تعتبر مكونات تقليدية للأغذية النباتية مثل البروتينات والدهون والكربوهيدرات او الفيتامينات .ومن الممكن ان ينتج عن التعديل الوراثي تخليق مواد نشطة ذات تأثير سام وعكسي علي الكائنات ،بالإضافة الي ذلك ينتج عن نشاط الانزيمات المولدة بواسطة تعبير الحامض النووي DNAالمقدم مواد جديدة تتضمن مركبات تمثيلية وفي النهاية فبسبب مبررات تكنيكية تتكون المادة الوراثية المدخلة بالإضافة الي الجينات المرقم الجزيئي والحامض النووي الجاني Borderوفي الوقت الحالي ينتج عن طرق التحول المستخدمة تكامل لتعاقبات )لسلاسل( المادة الوراثية Genomeالنبات مما يؤدي الي سلسلة من التغيرات الغير متوقعه ويجب مراعاة أن تقييم السمية للمحصول المعدل وراثيا يتضمن مقاومة الآفات بيولوجيا بحيث يمنع تقييم السمية

للمركب الغذائي المزيد من المشاكل.

٣٤٥

تحليل الخاصية الجزيئية وتحليل المكونات

معلومات عن تعاقبات الحامض النووي : DNA

يجب تقييم امان جينات المرقم وعند اقتراح وجود جين المرقم أو جين المنتج يؤدي الي وجود مخاطرة علي الإنسان او صحة الحيوان فإن جين المرقم اوجين المنتج يجب الا يكون موجودا في المحصول المعدل وراثيا .ومن جهة اخري فإن تكنولوجيات التحول البديلة التي لا ينتج عنها جينات مرقم مقاومة للمضادات الحيوية يجب تشجيعها في التطور

المستقبلي للكائنات المعدلة وراثيا.

تقييم السمية : Toxiciological assessment

اختبارات السمية :

الاحتياجات :

البروتين والمواد غير البروتينيه الجديدة:

تقدير الهضم معمليا في سائل المعدة او سوائل الأمعاء مطلوب عند تقييم السمية ومن الضروري ملاحظة ان مقاومة هضم المعمل ليست نقطة نهاية السمية ولكنها دليلا علي أن البروتين يجيز ويضمن اختبار أقرب وأدق .ومن جهة أخري فإنه هناك ضرورة لاختبار سائل المعدة للحيوان من خلال تقرير معاملات الهضم علي الحيوان نفسه in vivoبالنسبة للمواد غير البروتينية الجديدة يراعي تقييم السمية علي اساس حالة بحالة بالاعتماد علي الوظيفة البيولوجية للمادة في النبات وطبقا لإرشادات مناسبة وطريقة تقليدية لتقييم السمية.

السمية الشديدة : Acute toxicity

سمية الفم الشديدة للمواد الجديدة )البروتينية وغير البروتينية( :

اختبار سمية الفم الشديدة في الحيوانات القارضة المعملية يتطلب التأكيد علي نقص السمية المقترحة بواسطة المراجع البحثية .كما أن جرعة الدراسة الوحيدة ربما تعطي بيانات مفيدة لوصف علاقة الجرعة بالسمية بالإضافة الي ذلك فإن هذه البيانات يمكن استخدامها في اختيار جرعات من أجل دراسات سمية الجريمة المكررة ويراعي مراقبة الحيوانات لمدة ١٤ يوم للتأكد من عدم وجود أعراض عكسية ثم تعريضهم بعد ذلك لتشريح كامل .وفي فترة

٣٤٦

المراقبة يؤخذ في الاعتبار التغيرات في الجلد والفرو والعين والأغشية المخاطية بجانب الأجهزة التنفسية والجهاز العصبي المركزي والجهاز الدوري.

هناك طريقة بديلة وهي اختبار سمية الحيوانات الثديية باستخدام مادة نقية مع مراعاة اختيار مستوي الجرعة المستخدمة في الاختبار من احدي المستويات الأربعة الثابته للجرعة وهي صفر ،٥٠٠ ،٥٠ ،او ٢٠٠٠ميللجرام/كيلو جرام وزن جسم

اختبارات التهيج : Irritation

المواد الجديدة البروتينية وغير البروتينية :

يجب الأخذ في الاعتبار اختبار تهيجات الجلد والعين لأن العاملين يتعرضون لغبار

الحشرات وغبار المحاصيل.

المواد غير البروتينية الجديدة:

يجري اختبار الأمان الضوئي )تهيج ضوئي (Photoirritationبالتناسق مع بروتوكولات

مرشدة مناسبة.

الحساسية Sensitization

المواد الجديدة البروتينية وغير البروتينية :

اختبار الحساسية )نظ ار لتعرض العمال للأتربة المحاصيل والحشرات( يجب ان يؤخذ في الاعتبار في نفس الوقت مع تقييم الحساسية وتقييم الحساسية المناعية تستخدم اختبارات هامة مثل Guinea Pig Maximisation test :او اختبارات أحدث مثل

Local

.lymph Node Assay

السمية الوراثية : Genotoxicity

المواد البروتينية الجديدة :

يجب إجراء اختبارات المطفرات mutagenicityالمعملية علي اساس كل حالة علي حدة بالاعتماد علي المطابقة والوظيفة البيولوجية للمادة في النبات.

٣٤٧

المواد غير البروتينية الجديدة :

يعتبر اختبار المطفرات mutagenicityالمعملي إجباريا اذا لم يمد بدليل مقنع لانحرافه عن الإجراءات القياسية .واستخدم بروفيل السمية معمليا مثل اختبار السمية الوراثية والخلية بجانب استخدام التقديرات الجينية الكائنات الراقية eukaryoticوالإجهاد البكتيري ربما

يكون له أهمية في الاستراتيجيات المستخدمة.

سمية الجرعة المكررة عن طريق الفم : Repeated dosetoxicity oral route

المواد البروتينية الجديدة :

يجب اجراء اختبار سمية الفم عند اليوم الثامن والعشرين لأن أدني احتياج للعليقة التي يتغذي عليها الحيوان القارض المختبر تحتوي علي كميات كافية من البروتين الجديد.

ويراعي ان يكون أعلي مستوي للجرعة هو اقصي مستوي لا يسبب عدم اتزان غذائي بينما يكون اقل مستوي مستخدم قريبا من مثيلة الذي يتناوله الإنسان .يجب ان تجري الأبحاث الإضافية المستهدفة اذا كان هناك شك في أن البروتين الجديد يؤثر في أعضاء خاصة

بالجهاز التناسلي أو العصبي أو الهرموني.

المواد غير البروتينية الجديدة:

المواد غير البروتينية الجديدة والنواتج التمثيلية البيولوجية يجب تقييمها طبقا لطريقة تقييم

السمية التقليدية علي أساس كل حالة علي حدة.

اختبار سمية الغذاء الكامل :Whole-Food Toxicology Testing اختبار الغذاء الكامل يجب أن يجيب علي التساؤل اذا ما أدخلت تأثيرات عكسية غير مقصودة عقب التعديل الوراثي .ويجب أن يجري اختبار الغذاء الكامل علي حدة في

الحالات التالية:

.١جين جديد كامل أو الكائن المعدل وراثيا.

.٢الكائنات المتغيرة نتيجة لتكنولوجيا البيولوجية عن طريق الهندسة الوراثية.

.٣مواد جديدة مثل مضادات المركبات الغذائية.

.٤مواد جديدة )مثل السموم البكتيرية(

٣٤٨

.٥منتجات ذات مستويات عالية من البروتين الجديد .٦بروتينات غير قابلة للتكسير السريع )مثل مثبطات انزيم البروتييز واللاكتين( أو نباتات المحصول ذات التركيب المعدل )مثل الأرز المنخفض الجيلاتين( .٧النباتات المنقولة وراثيا الغير منشطة لمبيدات الأفات المنتجة للمنتجات التمثيلية

التي ربما تتواجد في النبات

.٨المستوي العام للنبات )مثل القلويات(

يجب اختبار المنتج الغذائي في الحيوان المختبر المناسب ويراعي ايضا اجراء اختبار التغذية علي الحيوانات القارضة لمدة ٩٠يوما .كما يوصي بإجراء الدراسة علي الأعلاف علي الحيوانات سريعة النمو مثل دجاج التسمين .ويراعي تجنب مشاكل عدم التوازن الغذائي ويجب ان يكون المنتج الغذائي المختبر في صورة مشابهه لمثيله الذي يتناوله الانسان او الحيوان .ويجب ان تكون النباتات المستخدمة مزروعة تحت الظروف العملية الطبيعية لمحصول النبات) مثل :استخدام مبيدات الأفات لمقاومة الآفات(.

تقييم التركيب الكيماوي : Chemical Composition Assessment يعتبر التباين في المركبات الغذائية هاما مما يستدعي تغطية الاحتياجات الغذائية .ولذلك من الضروري تحليل تركيب الغذاء المعدل وراثيا وتحقق المدي الذي عنده المنتج يعادل مثيله في الغذاء الغير معدل وراثيا .والفروق المعنوية في التركيب الكيماوي ربما تسمح بفحص محكم اثناء عملية تقييم الأمان للمنتج الغذائي مع الأخذ في الاعتبار التعديل الوراثي كما أن تقييم الكمية المأكوله من الغذاء هاما وضروريا لتقييم الغذاء المعدل وراثيا

ولتقييم أهميتة الغذائية.

تحليل التركيب الكيماوي : Compositional annlysis

المركبات الغذائية الصغري والكبري:

يتضمن التحليل الكيماوي قائمة بالمركبات الغذائية التالية:

نسبة الرطوبة) ،نسبة البروتين والدهن والرماد والكربوهيدرات علي أساس المادة

الجافة(.

٣٤٩

الأحماض الامينية ) %من الوزن الجاف % ،للأحماض الامينية الكلية(:

-أحماض أمينية ضرورية :ارجنين ،هستين ،ايزوليوسين ،ليوسين ،ليسين، مثيونين ،فينايل الانين ،ثريونين ،تربتوفان ،فالين(.

-أحماض امينية غير ضرورية :الانين ،حامض اسبارتيك ،سيستين ،حامض جلوتاميك ،جلوتامين ،جليسين ،برولين ،سيرين ،تيروزين.

الأحماض الدهنية ) %من المادة الجافة % ،للدهن الكلي(.

الكربوهيدرات ) %من المادة الجافة(.

السكرات الأحادية والثنائية والنشا:

سكريات حديدي اخري. الألياف الخام. العناصر المعدنية )الكبري والصغري(.

الفيتامينات )الذائبة في الدهن :أ ،د ،ه ،ك – الذائبة في الماء )فيتامين ج،

ومجموعة فيتامين ب المركب(.

البروتينات : Proteins

يقدر محتوي البروتين باستخدام جهاز كلداهل ولقد اقترحت ) AOACالهيئة الرسمية للتحليل الكيماوي( تعديلات لتحليل النيتروجين في الحبوب النجيلية والمنتجات الحيوانية ومنتجات الألبان وفي بعض الحالات )مثل منتجات الألبان( يوصي بترسيب البروتين بواسطة حامض الخليك ثلاثي الكلور TCAلتقدير كمية نيتروجين البروتين الحقيقي

وليس كمية النيتروجين الكلي.

الأحماض الأمينية : Amino acids

يحصل علي الاحماض الامينية الكلية بعد كسر الروابط الببتيدية والفصل بواسطة التحليل الكروماتوجرافي والطرق التقليدية يمكن استخدامها في جميع الأحماض الامينية باستثناء التربتوفان )يدمر كاملا( والأحماض الامينية الكبريتية التي تتأكسد.

٣٥٠