الإنتاج العضوي

2.1.6 Precautions

Methylene blue solution should be protected from any contamination. The reagent should be stored in dark when not in use to protect from light.

Fresh reagent should be prepared frequently.

Water bath should be covered to maintain darkness inside the chamber

during incubation of the tubes.

The temperature of the water bath should be brought to 37°C before

beginning the test.

There should be no electric failure and the temperature of the water bath should be maintained at 37°C throughout the period of incubation of

tubes.

: Precautions الاحتياطات والتحذيرات

فيreagent • يجب حماية محلول الازرق ميثلين من أي تلوث كما يجب تخزين المحلول المنظم .مكان مظلم في حالة عدم استخدامه وذلك لحمايته من الضوء

.• يراعي اعداد المحلول المنظم بصورة متكررة

.• يجب تغطية الحمام المائي للمحافظة علي استمرار الاظلام داخل الغرفة اثناء تحضين الانابيب . درجة مئوية قبل بداية الاختبار٣٧ • يجب ان تكون درجة ح اررة الحمام المائي في حدود • يجب ان لا يكون هناك انقطاع في التيار الكهربي مع المحافظة علي درجة ح اررة الحمام المائي

. درجة مئوية طوال فترة تحضين الانابيب٣٧ عند

2.1.7 Limitations: :التحديدات

• يقوم الاختبار بتدريج اللبن علي اساس المحتوي البكتيري ولكنه لا يظهر اعداد البكتريا في

.العينه

.• يتباين معدل اختزال الصبغة حسب معدل انواع البكتريا المختلفة عند درجة الح اررة المعطاه .• وجود مواد مثبطة في اللبن ربما يثبط نمو البكتريا ويبطيء من اختزال الصبغة

Record sheet - Methylene blue reduction test

Sample No.

Time interval

0 min

30 min

1 h 30 min

2 h 30 min

3 h 30 min

4 h 30 min

5 h 30 min

0 min

30 min

1 h 30 min

2 h 30 min

3 h 30 min

4 h 30 min

5 h 30 min

0 min

30 min

1 h 30 min

Colour

٣٤٣

MBRT

Grade

Interpretation

2 h 30 min

3 h 30 min

4 h 30 min

5 h 30 min

0 min

30 min

1 h 30 min

2 h 30 min

3 h 30 min

4 h 30 min

5 h 30 min

0 min

30 min

1 h 30 min

2 h 30 min

3 h 30 min

4 h 30 min

5 h 30 min

:( دقيقة٣٠ دقيقة)الزمن اللازم٣٠ اختبار اختزال صبغة ازرق المثيلين لمدة 2.2 Half-Hour Methylene Blue Reduction Test :

كما أنه يساعد في تقييم سلامة.هذا الاختبار سريع في تقييمه وتقديره لنوعية البكتريا باللبن الخام اللبن الخام والمحافظة علي نوعيته ويمنحه اجازية تصنيعه وهذا الاختبار موضوعي ويساعد في ٣٠ يستغرق تحضين اللبن في هذا الاختبار.تمييز نوعية اللبن الهزيل عن اللبن الجيد النوعية .دقيقة فقط ويتطلب هذا الاختبار ملاحظة وحيدة فقط تبني علي اساس اجراء تفسير لنوعية اللبن

:منها

2.2.1 Apparatus

Same as given in Section 2.1.1

2.2.2 Reagents

Same as given in Section 2.1.2

2.2.3 Procedure

The procedure is same as given in Section 2.1.3 except that incubation is done only for 30 minutes. The test requires only a single observation based on which the interpretation of the quality of milk is done.

2.2.4 Observations And Recording Of Results

Observe the tube(s) after 30 minutes of incubation for decolourization (blue

to white) as mentioned in Section 2.1.4.

The methylene blue reduction time (MBRT) is recorded as 30 minutes or less if the decolourization is observed within 30 minutes, otherwise the test

is recorded as negative.

٣٤٤

2.2.5 Interpretation

According to the guidelines by the Bureau of Indian Standards, the samples which show decolourization within 30 minutes or less are not suitable for

acceptance.

:التفسير

2.2.5 Interpretation:

فإن العينات التي تظهر ازالة لونهاBureau of Indian Standards طبقا للقياسات الهندية

. دقيقة او أقل لا يتم الموافقة عليها٣٠ خلال

MBRT (hours)

Grade of raw milk

5 and above

Very good

3 and 4

Good

1 and 2

Fair

%

Poor

. ساعات لنوعية مرضية٤ يجب أن تكون أكثر منMBRT قيم،فى حالة بسترة اللبن

2.2.6 Precautions

As given in Section 2.1.6.

2.2.7 Limitations

As given in Section 2.1.7.

Record sheet - Half-hour methylene blue reduction test

Sample No.

Time interval

0 min

30 min

0 min

30 min

0 min

30 min

0 min

30 min

0 min

30 min

Colour

٣٤٥

Result

Interpretation

Record sheet - Methylene blue reduction test

Interpretation

Grade

MBRT

Colour

Time interval

0 min

30 min

1 h 30 min

2 h 30 min

3 h 30 min

4 h 30 min

5 h 30 min

0 min

30 min

1 h 30 min

2 h 30 min

3 h 30 min

4 h 30 min

5 h 30 min

0 min

30 min

1 h 30 min

2 h 30 min

3 h 30 min

4 h 30 min

5 h 30 min

0 min

30 min

1 h 30 min

2 h 30 min

3 h 30 min

4 h 30 min

5 h 30 min

0 min

30 min

1 h 30 min

2 h 30 min

3 h 30 min

4 h 30 min

5 h 30 min

Sample No.

2.3 One Hour Resazurin Test:

اختبار ريزازورين لمدة ساعة:

يشكل الاختبار تكنيكا بسيطا لتقييم الأحوال الصحية السائدة اثناء انتاج وتخزين اللبن .ويبني هذا الاختبار علي نفس اساس اختبار اختزال صبغة الأزرق مثيلين ويقوم الاختبار بتقييم النوعية البكتيرية للبن مما يساعد في تدريج اللبن الخام .raw milk ومن جهة أخري يتم تدريج اللبن في مدة اقصر مقارنه مع اختبار اختزال صبغة الأزرق مثيلين.

كما أن اضافة الريزازورين يكسب اللبن لونا مائل للزرقة ويتحول الريزازورين الي ريزوروفين )لون قرنقلي( ثم يتحول الي داي هيدرويزوفين )عديم اللون( عند مراحل مختلفة لاختزال الصبغة ونتيجة لذلك فإن العينات المختلفة ذات الحمولات البكتيرية المختلفة تظهر ظلال مختلفة بعد عملية التحضين لمدة معينه .ويتمشي اللون الظاهر مع قرص "اسطوانه" اللون القياسي في الحاسب الألي وذلك للحصول علي تسجيل كمي للون الظل هذا.

٣٤٦

التفسير:

2.3.5 Interpretation:

قراءة القرص "الاسطوانه" Discتساعد في تدريج اللبن .كما ان الخطوط المرشدة السابق وصفها بواسطة القياسات الهندية Bureau of Indian standardsلتدريج اللبن الخام كما يلي:

الدرجة Grade

قراءة الاسطوانه Disc reading

جيد

٤أو أعلي

مقبول

٣.٥الي ١

ضعيف

٠.٥الي صفر

احتياطات هذا الاختبار مماثلة لاختبار اختزال صبغة أزرق المثيلين وكذلك فان التحديدات في هذا الاختبار مماثلة ايضا لمثيلاتها في اختبار اختزال صبغة الأزرق مثيلين.

2.3.6 Precautions

Similar to the methylene blue reduction test as given in Section 2.1.6.

2.3.7 Limitations

Similar to the methylene blue reduction test as given in Section 2.1.7.

Record sheet - Resazurin dye reduction test

Interpretation

Disc reading after 1 hour

٣٤٨

Sample No.

اختبار الريزازورين لمدة ١٠دقائق2.4 Ten-Minutes Resazurin Test: :

يستخدم هذا الاختبار لاستبيان ان اللبن فقير النوعية بسرعة جدا وذلك لانه يمدنا بمقياس سريع للحالة الصحية والمحتوي البكيري لعينة اللبن .واساس هذا الاختبار يماثل اساس الاختبار المستخدم في اختزال صبغة الريزازورين باستثناء ان تحضين انبوبة مخلوط الصبغة واللبن يتم خلال ١٠دقائق فقط وتسجل النتائج بعد ١٠دقائق تحضين ومن ثم يقل الوقت اللازم للأختبار.

2.4.1 Apparatus

Same as given in Section 2.3.1.

2.4.2 Reagent

Same as given in Section 2.3.2.

2.4.3 Procedure

The procedure is same as given in Section 2.3.3 except that the incubation

period is 10 minutes.

2.4.4 Observations and recording of results

Observe the tubes at the end of 10 minutes of incubation and record the results with the comparator as described in Section 2.3.4.

التفسير:

2.4.5 Interpretation:

التحكم في نوعية عينات اللبن يكون طبقا للخطوط المرشدة الموصوفة بواسطة القياسات المترية Bureau of Indian Standardsالموضحة في الجدول التالي:

الاحتفاظ بالنوعية keeping quality

قراءة الاسطوانه Disc reading

مرضي )مرضيا( satisfactory

٤أو أعلي

مشكوك فيه doubtful

٣.٥الي ١

غير مرضي unsatisfactory

٠.٥الي صفر

الاحتياطات والتحذيرات2.4.6 Precaution: :

الاحتياطات في هذا الاختبار تماثل نظيراتها في اختبار اختزال صبغة الازرق مثيلين.

التحديدات:

2.4.7 Limitations:

التحديدات في هذا الاختبار تماثل تحديدات اختبار اختزال صبغة الأزرق مثيلين.

Record sheet - Ten minute resazurin dye reduction test

Interpretation

Disc reading after 10 minutes

٣٤٩

Sample No.

النموذج الثالث :تقييم دقة بسترة اللبن :

Module 3: Evaluation Of Adequacy Of Pasteurization Of Milk :

من الضروري التحقق بأن اللبن او منتجات اللبن المتدفقة المسوقة كمنتجات مبسترة قد تم بسترتها بالطريقة السليمه وذلك بواسطة التعريض للح اررة عند درجات ح اررة كافية للقضاء علي جميع المسببات المرضية البكتيرية الموجودة في المنتج وفيما يلي الاختبارات المستخدمة لتقييم دقة وكفاية

البسترة.

اختبار انزيم الفوسفاتيز)يتطلب ساعتين(3.1 Phosphatase Test (Time Required :2h): :

يستخدم اختبار انزيم الفوسفاتيز للحكم علي كفاية بسترة اللبن وهذا الاختبار يبني علي استبيان انزيم الفوسفاتيز الذي يتواجد طبيعيا في اللبن الخام .وهذا الانزيم أكثر مقاومة للمعاملة الح اررية من المسببات المرضية البكتيرية حيث تستخدم توليفة من درجات الح اررة من اجل عملية بسترة اللبن .ولذلك فإن الاخماد الحراري لانزيم الكالين فوسفاتيز في اللبن يرتبط جيدا مع تدمير المسببات المرضية البكتيرية وفي حالة عدم كفاية المعاملة الح اررية )علي سبيل المثال :اقل من المعاملة الح اررية اللازمه لعملية البسترة( فان بعض من انزيم الفوسفاتيز يظل نشطا ،ووجود الانزيم في اللبن المبستر يوضح عدم كفاية المعاملة الح اررية او تلوث اللبن المبستر مع اللبن الخام ويستخدم Computorفي تقييم وتقدير كثافة اللون في صورة كمية.

3.1.1 Apparatus

Comparator with standard discs

Glass cells for comparator

Rubber-stoppered test tubes

Waterbath

3.1.2 Reagents

(a) Buffer solution

Dissolve 3.5 g of sodium carbonate and 1.5 g of sodium bicarbonate (analytical grade reagents) in one litre of distilled water.

(B) Disodium P-Nitrophenyl Phosphate Buffer Substrate )Dissolve 0.15 g of the substrate in 100 ml buffer solution (explained above

in a stoppered flask.

3.1.3 Procedure

Divide the milk sample in two portions, one is used for test and the other

for preparing negative control.

Boil the milk meant for preparing negative control so that its phosphatase

enzyme is inactivated.

Take two rubber stoppered test tubes (15 ml capacity) and label them as

‘test’ and ‘control’.

Add 10 ml buffer substrate in each of these test tubes.

Add 2 ml of test milk to the test tube labeled as ‘test’. Add 2 ml of boiled

milk to the test tube labeled as ‘control’.

Incubate both the test tubes at 37°C in a water bath for 30 minutes.

٣٥٠

After 30 minutes, transfer the contents of these tubes into the comparator

cells for comparison and record the results.

Return the tubes to the water bath for incubation for further 90 minutes.

Take the second reading with comparator after incubation.

3.1.4 Observations And Recording Of Results

Compare the yellow colour developed in the test sample tube with that in

the control tube with comparator.

Record the disc reading where the colours of the two tubes match.

3.1.6 Interpretation: :التفسير

يجري ترجمة النتائج كما هو موضح فيBureau of Indian Standards طبقا للقياسات الهندية

:الجدول التالي

Interpretation التفسير

بسترة سليمة

مشكوك فيها

تحت البسترة

Interpretation الترجمة

بسترة سليمة

عدم كفاية البسترة

دقيقة٣٠ قراءة الاسطوانه بعد

صفر او اقل

٦

أو اعلي١٠

قراءة الاسطوانه بعد ساعتين

١٠ صفر الي

١٠ اكثر من

3.1.6 Precautions: :الاحتياطات والتحذيرات

ساعة بسترة عند٤٨ يجب اجراء اختبار انزيم الفوسفاتيز في الحال بعد عملية البسترة او بعد

.التخزين عند درجة ح اررة الثلاجة

. ذات جودة عاليةreagents • يجب استخدام محاليل منظمة . طازجا وعديم اللونBuffer substrate • يجب ان يكون محلول .• يجب غلي السدادات المطاطيه قبل الاستخدام لجعلها خالية من الفينول .• يجب ان تكون الساق الزجاجية نظيفة وخالية من الفينول . دقيقة٣٠ • من الضروري اخذ قراءة ثانيه عندما يكون الاختبار سلبي بعد

3.1.7 limitations: :التحديدات

ساعة بسترة والسبب في ذلك٤٨ ربما يكون الاختبار ايجابي خاطيء عند اختبار بسترة اللبن بعد

.تحلل انزيم الفوسفاتيز

Record sheet - Phophatase test

Sample No.

Time of reading

30 minutes

2 hours

30 minutes

2 hours

30 minutes

2 hours

30 minutes

2 hours

30 minutes

2 hours

Disc reading

٣٥١

Interpretation