صفحة 391 الصفحة في PDF
8.1.7 Limitations: :التحديدات
وهذا يتطلب المزيد من التأكيدS.aureusتظهر المستعمرات البكتيرية ميكروب stophylococal enterotoxin هذا الاختبار لا يظهر حالة الغذاء في صورة ( المتطلبات الميكروبيولوجية المتعلقة بالبكتريا الممرضة في اللبن المصنع ومنتجات٨١) جدول الالبان طبقا لقياسات المنظمات )المنتجات الغذائية والاضافات الغذائية( والامن الغذائي Microbiological requirements concerning pathogenic bacteria in processed milk and milk products according to the Food Safety and Standards (Food Products Standards and Food
Additives) Regulations, 2011 (India)
Product
Sampling Escherichia Salmonella
Staph.
Listeria
(n=5)
plan
coli
aureus
monocytogenes
(coagulase
+ve)
Pasteurised milk,
M
Absent/g
Absent/25g
<10/g
Absent/g
cream, flavoured
milk
Sweetened
m
10/g (c=2)
condensed milk
M
Absent/g
Absent/25g
100/g
Absent/g
Pasteurised butter
m
10/g (c=2)
M
Absent/g
Absent/25g
50/g
Absent/g
Dried products:
M
Absent/g
Absent/25g
<10/g
Absent/g
milk powder,
cream, whey,
edible casein, ice
cream mix
Ice cream, frozen
M
Absent/g
Absent/25g
<10/g
Absent/g
dessert, milk lolly,
ice candy
Processed cheese,
M
Absent/g
Absent/25g
<10/g
Absent/g
cheese spread
All other cheeses
m
100/g (c=2)
M
<10/g
Absent/g
1000/g
Hard cheeseAbsent/g,
Other cheesesAbsent/25g
Yoghurt, dahi,
m
50/g (c=2)
chakka, shrikhand
M
Absent/g
Absent/25g
100/g
Absent/g
Paneer, chhana
m
50/g (c=2)
M
<10/g
Absent/g
100/g
Absent/g
Khoya
m
50/g (c=2)
M
<10/g
Absent/25g
100/g
Absent/g
n = The number of sample units which must be examined from the batch/lot of food.
m = Represents an acceptable level and values above it are marginally acceptable in terms of the sampling plan.
M = A microbiological criterion which separates marginally acceptable quality from unsatisfactory/potentially hazardous quality. Values above M are unacceptable and detection of one or more samples exceeding this level would be cause for rejection of the lot.
c = The maximum allowable number of defective sample units which may exceed the microbiological limit n = The number of sample units which must be examined from the batch/lot of food to satisfy the requirements of a particular sampling plan specified by m.
٣٨٢
صفحة 393 الصفحة في PDF
Record Sheet - Enumeration of S. aureus
Interpretation
cfu/ml
Dilution
factor
1
Colony count
Plate Plate Average
I
II
10
2
10
3
10
4
10
5
10
6
10
1
10
2
10
3
10
4
10
5
10
6
10
1
10
2
10
3
10
4
10
5
10
6
10
1
10
2
10
3
10
4
10
5
10
6
10
Dilution
Sample
No.
-1
10
-2
10
-3
10
-4
10
-5
10
-6
10
-1
10
-2
10
-3
10
-4
10
-5
10
-6
10
-1
10
-2
10
-3
10
-4
10
-5
10
-6
10
-1
10
-2
10
-3
10
-4
10
-5
10
-6
10
8.2 Detection of Slmonella:
كشف السالمونيلا )يتطلب ٥-٤ايام(:
تعتبر السالمونيلا من اكبر المشاكل الصحية التي تؤثر علي الانسان والحيوان في كل انحاء العالم.
وهناك عدد كبير من انواع ميكروبات السالمونيلا منتش ار في الطبيعة ومنتجات الالبان المصنعة غير الصحية تمثل مصد ار لهذه الميكروبات كما أن قوانين الاغذية بمعظم البلدان تحرم وجود مثل هذه الميكروبات في اي غذاء وعزل السالمونيلا يعتبر كذبا لان الكائنات الحية ربما تتواجد باعداد صغيرة ومن ثم فان طرق العزل تتضمن خطوات عديدة مثل ما قبل الاغناء ،الاغناء والشريحة الاختيارية لزيادة فرصة الكشف عن الكائنات الحية او الحكم الكامل علي امكانية وجود هذه
الميكروبات في الغذاء.
)8.2 Detection Of Salmonella (Time Required: 4-5 Days Salmonellosis is a major public health problem affecting man and animals throughout the world. A large number of serotypes of Salmonella are widely distributed in nature. Unhygienically processed dairy products can act as potential source of Salmonella. Food laws of most of the countries
٣٨٤
صفحة 396 الصفحة في PDF
sheet Table are considered as Salmonella. Hence the sample from which such isolate is obtained is considered as positive for Salmonella.
8.2.5 Interpretation
Salmonella should be absent in 25 g sample of dairy products (Table 8.1) in all food items. The presence of Salmonella indicates the food products should be
rejected.
8.2.6 Precautions:
:الاحتياطات
يجب اعلان نتائج الاختبار علي اساس مظهر المستعمرة البكتيرية علي حده بدون مطابقة النواتج المعزولة
.serologically كيموحيوية وحسيه
8.2.7 Limtations:
:التحديدات
.يحتاج الاختبار فترة زمنيه طويله جدا
٣٨٧
صفحة 397 الصفحة في PDF
:( )يتطلب يومينBacillus Cereus عد ميكروبات
8.3. Enumeration Of Bacillus Cereus (Time Required: 2 Days):
جراثيم متواجده بصفة شائعة في البيئة ونظ ار لطبيعتها السامة فانهاBacillus cereus تعتبر
.تعتبر عامل هام لسمية الغذاء
8.3.1 Apparatus
Petri dishes with culture medium
Sterile pipettes
Test tubes
Test tube rack
Spreader (L-shaped glass rod)
Beaker
Incubator at 37°C
Burner
Marking pen
8.3.2 Culture Media/Reagents
(A) Mannitol Egg Yolk Polymyxin Agar (MEYP)
Beef extract
:
1g
Peptone
:
10 g
D-Mannitol
:
10 g
Sodium chloride
:
10 g
Phenol red
:
25 mg
Agar
:
20 g
Suspend 46 g of dehydrated powder of above mentioned composition in 900 ml distilled water. Mix thoroughly and heat with frequent agitation and boil for 1 minute to completely dissolve the powder. Dispense 225 ml into 500 ml flasks and then autoclave at 121 °C for 15 minutes. Cool to 4550°C. Aseptically add 12.5 ml of 50% egg yolk suspension and quantity of polymyxin equivalent to 25,000 IU. Mix thoroughly and then prepare
plates.
(B) Sterile 0.85% Saline Solution
8.3.3 Procedure
Weigh 10 g sample and homogenize with 90 ml diluent (saline solution)
and make further 10-fold serial dilutions.
Inoculate..1 ml from each dilution by spread technique on the culture medium plates in duplicate and incubate the plates at 37 C.
B. cereus forms pink-red colonies with an opaque zone of turbidity.
8.3.4 Observations And Recording Of Results
Count the colony forming units in an appropriate dilution.
Calculate the bacterial count per ml by taking into account the dilution
factor.
٣٨٨
صفحة 398 الصفحة في PDF
8.3.5 Interpretation
Determine the quality of the product based on the guidelines/ standards for
that particular product.
الاحتياطات والتحذيرات8.3.6 Precautions: :
تقدر نوعية المنتج علي اساس الخطوط المرشدة/القياسات لذلك المنتج.
اثناء عمل البيئة البكتيرية يجب ان يؤخذ في الاعتبار اضافة صفار البيض والبولي ميكسين Bالي قاعدة بيئة الاستزراع المبردة حتي درجة °٤٥الي °٥٠م.
8.3.7 limitations:
التحديدات:
ربما لا يتمكن الاختبار من كشف وجود البكتيريا عند تواجدها باعداد صغيرة جدا في الغذاء.
Record sheet - Enumeration of B. cereus
Interpretation
cfu/g
Dilution factor
Colony count
Plate II
Average
1
Dilution
Sample No.
Plate I
-1
10
10-2
-3
10
10-4
10-5
10-6
10-1
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
10-1
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
10-1
10-2
10-3
10-4
10-5
10-6
10
102
3
10
104
105
106
101
102
103
104
105
106
101
102
103
104
105
106
101
102
103
104
105
106
النموذج التاسع :كشف مخلفات المضادات الميكروبية والمواد الكيماوية السامة في الأغذية:
Module 9: Detection Of Antimicrobial Residues And Toxic Chemicals
In Foods:
استخدم عدد من الأدوية من أجل الاغراض العلاجية او من اجل تشجيع نمو الحيوانات من الأمور الشائعة في ممارسات تربية ورعاية الحيوان الحديثة .ومن أمثلة هذه الادوية :مضادات الميكروبات والهرمونات والمهدئات وغيرها .كما أن الحيوانات تتعرض ايضا لكثير من الملوثات البيئية والتي من أمثلتها :المبيدات الحشرية ومبيدات الحشائش والعناصر المعدنيه الثقيلة وغيرها .ومخلفات هذه الكيماويات ربما تظهر في الأغذية ذات الأصل الحيواني وكثير منها ربما يكون ضا ار للمستهلكين.
الأدوية المضادة للميكروبات تشكل مصنف اساسي لمثل هذه الكيماويات بالنسبة للصحة العامة كما ان مخلفات هذه المضادات الميكروبية في الاغذية ينجم عنها مشكلة تطور سلالات ميكروبات
٣٨٩
صفحة 399 الصفحة في PDF
مقاومة وتنتشر خلال سلسلة الغذاء وهناك ايضا عوامل معينه تسبب مشاكل في الحساسية فيما
.بين الاشخاص
يمكن الكشف عن مخلفات المضادات الميكروبية بواسطة اختبار بسيطة مبني علي اساس تثبيط ومن جهة أخري يحتاج الكشف عن. نمو البكتريا بواسطة مخلفات المضادات الميكروبية الكيماويات السامه الأخري الي معدات خاصة وتكنيكات مثل التحليل الكروماتوجرافي وتقديرات , وغيرهاSpecrographic المناعة وطرق التحليل الطيفي :( ساعة٢٤ اختبار الكشف عن المخلفات المضادة للميكروبات في اللبن )يتطلب الاختبار 9.1 Test For Antimicrobial Residues In Milk (Time Required: 24 H):
. في بيئة الاستزراعSarcinalutea مخلفات المضادات الميكروبية في اللبن تظهر نمو بكتريا وتكوين مناطق واضحة للتثبيط بواسطة عينات اللبن المحضنة مع بيئات الاستزراع البكتيرية بعد .التحضين طوال الليل تظهر "تدل علي" وجود مخلفات المضادات البكيترية
9.1.1 Apparatus
Sterile petri dishes
Desiccators
Well-cutter
Refrigerator
Incubator at 30°C
Filter paper
9.1.2 Culture Medium/Reagent
Meat extract peptone agar in petri dish
Meat extract peptone broth
0.85% saline solution
9.1.3 Bacterial Culture
Sarcina lutea, 24 hour culture in meat extract peptone broth
9.1.4 Procedure
Take a freshly prepared plate of meat extract peptone agar and dry it in a
desiccator for two hours to remove moisture.
Inoculate the agar plate with 0.1-0.2 ml of Sarcina lutea culture by spread plate method and dry the uncovered plate for 30 minutes in a desiccator.
Cut wells in the agar with well-cutter.
Seal the bottom of each well with melted agar medium.
Charge the wells with the milk samples.
Place the plates in the refrigerator at 4°C for 2 hours to allow diffusion of
samples in the agar.
Put moistened filter paper in the lid to avoid excessive drying of culture
medium.
Incubate the petri dish at 30°C for 16-18 hours.
9.1.5 Observations And Recording Of Results
Observe the plate for clear zones of inhibition of growth of the test culture
around the wells and record the results.
٣٩٠
صفحة 400 الصفحة في PDF
9.1.6 Interpretation
Zone of inhibition surrounding a well indicates the presence of
antimicrobial residues in the sample.
الاحتياطات:
9.1.6. Precautions:
* -يجب ان يكون اختبار الاستزراع في الطور اللوغاريتمي Log phaseللنمو والا يكون قديم
جدا .
* -في حالة النمو المكثف dense growthيجب اجراء تخفيف في %٠.٨٥محلول ملحي
معقم.
التحديدات:
9.1.7 Limitations:
منطقة التثبيط تدل علي وجود مخلفات المضادات الميكروبية ولكنها تخبرنا عن هوية المادة.
Record sheet - Test for antimicrobial residues in milk
Diameter of clear zone of
Result Interpretation
inhibition
Sample
details
النموذج العاشر :تقييم السلامة الصحية لمنتجات معامل الألبان :
Module 10: Evaluation Of Diary Plant Sanitation :
تعتمد النوعية الصحية لمنتجات الألبان علي الأحوال الصحية السائدة في معامل تصنيع الألبان ومن الضروري المحافظة علي المعدات والأواني في المعمل في حالة نظيفة جدا لمنع تلوث المنتجات ،كما ان نوعية الماء والهواء في معامل تصنيع منتجات الألبان تحتاج الي اهتمام شديد لمنع تلوث المنتجات ومن ثم يراعي اجراء تقييم بصورة منتظمة للحالة الصحية في معمل تصنيع منتجات الألبان وذلك عن طريق الفحص الميكروبيولوجي لكل من المعدات والأواني والبيئة.
10.1 Evaluation Of Equipment Sanitation:
تقييم سلامة المعدات:
تتطلب الممارسات الصحية الجيدة احتكاك المنتج بأسطح جميع الأواني المستخدمة وكذلك المعدات والأدوات المستخدمة في تداول وتخزين ونقل اللبن لكي تكون نظيفة بعد كل استخدام ولكي تكون سليمه صحيا قبل اعادة استخدامها ولذلك يجب تقييم كفاءة عملية التنظيف والتعقيم.
Evaluation Of Equipment Sanitation
Good sanitation practices require the product contact surfaces of all multiuse containers, equipment and utensils used in the handling, storage or transportation of milk to be cleaned after each usage and to be sanitized prior to reuse. It is, therefore, necessary to assess the efficiency of sanitation process. Rinse solution method and the swab contact method are used to collect the samples for laboratory examination for microbiological
quality.
٣٩١